[發明專利]一種野生異齒裂腹魚精液冷凍保護劑

在審

• 申請號: 202011601099.2
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN113016777A
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發明（設計）人: 曾本和;王萬良;閆志強
• 申請（專利權）人: 西藏自治區農牧科學院水產科學研究所;重慶市畜牧科學院
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 天津合正知識產權代理有限公司 12229
• 代理人: 馬云云

本發明提供了一種野生異齒裂腹魚精液冷凍保護劑，由冷凍基礎液、荷葉提取物和絞股藍多糖組成。本發明通過添加荷葉提取物和絞股藍多糖提高對異齒裂腹魚精液的保護，減少冷凍過程中的活性氧對精子的損傷。

技術領域

本發明涉及魚類養殖技術領域，尤其是涉及一種野生異齒裂腹魚 精液冷凍保護劑。

背景技術

異齒裂腹魚隸屬于鯉形目,鯉科,裂腹魚亞科,裂腹魚屬,俗稱歐氏 弓魚,副裂腹魚,異齒弓魚,地方名為棒棒魚,是一種我國特有的高原冷 水性魚種,分布于雅魯藏布江中上游干支流及附屬水體中。為了保護 野生異齒裂腹魚，一方面是開展異齒裂腹魚的養殖業，另一方面是需 要對野生異齒裂腹魚進行保護，而對異齒裂腹魚精液冷凍保存，不但 可以提高異齒裂腹魚人工繁殖過程中的受精率，而且還有利于異齒裂 腹魚的種質資源的保護。

相關研究表明，精液在冷凍平衡過程中，不可避免的通過呼吸代 謝產生大量的活性氧(ROS),其所攜帶的氧自由基(O^2-、H₂O₂和-OH) 能使精子細胞膜的不飽和脂肪酸發生氧化，造成精子細胞膜損傷，最 終導致豬精子受精能力急劇下降。因此，在冷凍液中加入抗氧化成分 可以起到一定的保護作用。

荷葉提取物中主要含有黃酮類、生物堿類和鞣質類成分，黃酮類 物質是大多數氧自由基的清除劑，對治療冠心病、高血壓等疾病有顯 著效果，并且有抗菌消炎的作用；荷葉提取物在較低的濃度下即可顯 示出非常強的抗氧化能力。生物堿有降血脂作用、抗自由基、抑制高 膽固醇血癥和動脈硬化等藥療、食療功效，而且還有較強的抑菌效果。

絞股藍又名七葉膽、甘茶蔓、七葉參，是葫蘆科絞股藍屬植物。 絞股藍主要有效成分之一為絞股藍總皂甙，有80余種。絞股藍有“南 方人參”之稱，其總皂甙含量是人參總皂甙的四倍，具有降血脂，降 血壓，坑疲勞，抗衰老，促生長，防癌抗癌等功效。絞股藍主要有效 成分之二是絞股藍多糖，它具有SOD類似的活性，可清除超氧陰離 子(O^2-)和羥基自由基(OH)，據最近有關研究證實，絞股藍多糖可抑制 腫瘤細胞的增殖，絞股藍多糖無任何毒副作用，且能對抗化療藥物引 起的骨髓抑制等不良反應，保護細胞免受自由基的攻擊，對機體的免 疫機能有一定的增強作用，并有抗氧化、抗衰老等作用。

目前，鮮少有將荷葉提取物和絞股藍多糖應用于魚類精液的冷凍 保存上。所以，本研究通過大量反復試驗和劑量冷凍篩選，發現了荷 葉提取物和絞股藍多糖在魚類精液冷凍保護中具有顯著的效果。

發明內容

有鑒于此，本發明旨在提出一種野生異齒裂腹魚精液冷凍保護劑， 以提高對異齒裂腹魚精液的保護，減少冷凍過程中的活性氧對精子的 損傷。

為達到上述目的，本發明的技術方案是這樣實現的：

一種野生異齒裂腹魚精液冷凍保護劑，由冷凍基礎液、荷葉提取 物和絞股藍多糖組成，所述荷葉提取物由包括如下步驟的方法制備得 到：

1)稱取新鮮荷葉和干荷葉，并分別進行粉碎，將得到的新鮮荷 葉碎和干荷葉碎用纖維素酶預處理1-2h；

2)分別將處理后的新鮮荷葉碎和干荷葉碎按照料液比1:5-10加 入到高濃度乙醇溶液中常溫浸泡3-6h，同時進行超聲處理；

3)之后分別向浸泡有新鮮荷葉碎和干荷葉碎的溶液中加入純化 水，使料液比達到1：20-30，常溫下，超聲處理6-12h；

4)將處理后的溶液浸提、減壓濃縮后凍干，粉碎，得到新鮮荷 葉提取物和干荷葉提取物備用；

5)將新鮮荷葉提取物和干荷葉提取物按照重量份數比0.5-2:1混 合得到荷葉提取物。

進一步，所述冷凍基礎液、荷葉提取物和絞股藍多糖的重量份數 比為90-120:0.5-1:0.05-0.1。