[發明專利]一種液質聯用測定血漿中特拉唑嗪濃度的方法

在審

• 申請號: 202011600890.1
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN112748205A
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發明（設計）人: 范志鴻
• 申請（專利權）人: 徐州立順康達醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 北京淮海知識產權代理事務所(普通合伙) 32205
• 代理人: 李妮

1.一種液質聯用測定血漿中特拉唑嗪濃度的方法，其特征在于：血漿樣本經預處理后經高效液相色譜-串聯質譜檢測其濃度，具體方法包括以下步驟：

(1)血漿樣本預處理：

血漿以K₂EDTA為抗凝劑，以特拉唑嗪-d8為內標；于96深孔板中精密加入50μL的血漿樣本，加入5μL體積比為1：1的甲醇水溶液，混勻后加入10μL的0.1ng/μL的內標特拉唑嗪-d8溶液，混勻后加入500μL的甲醇，渦旋混合10min，于20℃以3000rpm離心10min，取上層清液50μL至另一裝有450μL混合有機溶劑的96深孔板中，于20℃以3000rpm離心5min后作為測試樣本待檢測；其中：混合有機溶劑為甲醇：水：甲酸：1M醋酸銨按照體積比40：60：0.2：0.2混合得到的混合溶液；

(2)試樣測定：

取10μL測試樣本注入高效液相色譜-串聯質譜儀中，檢測樣本中特拉唑嗪和內標特拉唑嗪-d8的色譜峰，并據此計算所述血漿樣本中的特拉唑嗪濃度；

液相色譜測定條件為：色譜柱為Synergi^TMPolar-RP柱規格為2.1×50mm；色譜柱溫為40℃；流動相A為水：甲酸：1M醋酸銨按照體積比100：0.2：0.2混合得到的混合物；流動相B為甲醇：甲酸：1M醋酸銨按照體積比100：0.2：0.2混合得到的混合物；洗液為甲醇：水按照體積比70：30混合得到的混合物；自動進樣器溫度為15℃；梯度洗脫，流速為0.5mL/min，進樣量為10μL，分析時間4.3min；

質譜測定條件為：離子源為電噴霧離子源，噴霧電壓為5500V，霧化溫度為450℃，噴霧氣壓力為30Psi，輔助加熱氣壓力為30Psi，氣簾氣壓力為30Psi，碰撞氣壓力為8Psi，特拉唑嗪和內標特拉唑嗪-d8的去簇電壓均為40eV；特拉唑嗪和內標特拉唑嗪-d8的碰撞室入口電壓均為8eV；特拉唑嗪和內標特拉唑嗪-d8的碰撞電壓均為43eV；特拉唑嗪和內標特拉唑嗪-d8的碰撞室出口電壓均為36eV；正離子方式檢測；掃描方式為多重反應監測；用于定量分析的離子反應分別為：m/z 388.2→m/z 247.1，其為特拉唑嗪；和m/z 396.3→m/z 298.1，其為特拉唑嗪-d8。

2.根據權利要求1所述的一種液質聯用測定血漿中特拉唑嗪濃度的方法，其特征在于：所述步驟(2)中梯度洗脫的程序為：

3.根據權利要求1或2所述的一種液質聯用測定血漿中特拉唑嗪濃度的方法，其特征在于：所述步驟(2)中，采用內標法，以特拉唑嗪和內標特拉唑嗪-d8的峰面積比值帶入標準曲線方程計算所述血漿樣本中的特拉唑嗪的濃度。