[發明專利]一種提高重組柯薩奇病毒穩定性的方法

在審

• 申請號: 202011600452.5
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN112574887A
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 蔡立剛;曹雪芹;劉志毅
• 申請（專利權）人: 武漢博威德生物技術有限公司
• 主分類號: C12N1/04
• 分類號: C12N1/04;C12R1/93
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 張仁杰

本發明涉及及生物制品制備技術領域，具體公開了一種提高重組柯薩奇病毒穩定性的方法，將細菌脂多糖(LPS)作為保護劑加入病毒保存體系可以有效提升柯薩奇病毒的熱穩定性，可以方便柯薩奇病毒的運輸和保藏，為柯薩奇病毒的研究提供更多便利。

技術領域

本發明屬于生物制品制備技術領域，具體涉及一種提高重組柯薩奇病毒穩定性的方法。

背景技術

細菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是革蘭氏陰性細菌細胞壁外壁的組成成分，是由脂質和多糖構成的物質(糖脂質)。脂多糖存在于覆蓋全身的外膜(脂質雙分子層)的細胞外側的脂質中。在LPS的生理活性表現中被認為起到最重要作用的是類脂A部分，類脂A可以單獨體現其生理作用。

LPS很難從細胞壁脫落，當細菌死亡等時它會通過溶解、破壞細胞來脫落。LPS具有熱穩定性和化學穩定性，用一般的高壓滅菌器或干熱滅菌法是無法讓其滅活的。要想讓其滅活就需要用250℃的高溫加熱30分鐘。

熱穩定性是流感病毒的固有生物學特性,主要由病毒的血凝素蛋白決定,并且與環境溫度、pH、鹽度、空氣濕度和界面性質等理化因素密切相關,在病毒進化與傳播過程中發揮重要作用。

柯薩奇病毒(Coxsacie virus，CV)為1948年Gillbert Dalldorf博士和他的同事在尋找治愈脊髓灰質炎疾病的過程中在糞便樣品中首次獲得，因在紐約柯薩奇小鎮發現而得名。同其他類型腸道病毒相同，柯薩奇病毒可通過糞—口途徑和口—口途徑傳播。其中，接觸感染者糞便污染的水、食物及土壤可以導致糞—口途徑傳播。一般情況下，嬰幼兒大多隱性感染；而5歲以下，尤其是3歲以下兒童，排毒時間可長達一個月。病毒感染人體后，可引起上呼吸道感染、急性心肌炎等疾病，對嬰幼兒的健康造成嚴重威脅。

柯薩奇病毒具備RNA病毒的共性，由于其結構簡單、穩定性差，突變更快，進而為診斷試劑的研發和治療藥物的研發帶來極大的挑戰；此外柯薩奇病毒的熱穩定性差，不便于運輸和保藏，給病毒的研究帶來諸多不便。

基于現有技術中存在的技術問題，因此有必要提出一種提高重組柯薩奇病毒熱穩定性的方法。

發明內容

鑒于此，本發明的目的在于提供一種提高重組柯薩奇病毒穩定性的方法，解決現有技術中柯薩奇病毒的熱穩定性差，不便于運輸和保藏的問題。

為解決上述問題，本發明方案如下：

本發明提出LPS在柯薩奇病毒B3保存試劑盒中的應用。進一步地，所述應用中，LPS作為保護劑提高柯薩奇病毒B3的熱穩定性。

根據本發明的實施例，所述LPS濃度為50-1000μg/ml；優先為50μg/ml、100μg/ml、500μg/ml、1000μg/ml；更優選地，所述LPS濃度優選500μg/ml。

本發明還有一個目的在于，提出一種提高重組柯薩奇病毒穩定性的方法，步驟包括，將病毒經細胞培養、純化后與LPS混育保存，所述病毒為柯薩奇病毒B3。進一步地，所述LPS濃度為50-1000μg/ml；優選為500μg/ml。

與現有技術相比，本發明的有益效果為：

本發明提出LPS可用于提高重組柯薩奇病毒熱穩定性，并且在500μg/ml濃度下熱穩定性更好，可以作為病毒保存試劑盒用于病毒的運輸和保藏，給病毒的研究帶來極大的方便。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例的技術方案，下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，應當理解，以下附圖僅示出了本發明的某些實施例，因此不應被看作是對范圍的限定，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他相關的附圖。

圖1為本發明LPS條件下熱處理對柯薩奇病毒活力與未加LPS的對比結果示意圖。