[發(fā)明專利]用于檢測大口黑鱸虹彩病毒抗體的ELISA試劑盒及其檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011600241.1
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN112759629B
• 公開（公告）日: 2021-10-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李中圣;劉文娜;張鈺薇;王鳳求;黃錦爐;尹興強;李濤;羅律;曹夢蕊
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東海大畜牧獸醫(yī)研究院有限公司
• 主分類號: C07K14/01
• 分類號: C07K14/01;G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 廣州嘉權(quán)專利商標事務(wù)所有限公司 44205
• 代理人: 景鵬

1.一種抗體捕獲劑，其特征在于，所述抗體捕獲劑為具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的多肽。

2.用于檢測大口黑鱸虹彩病毒抗體的ELISA試劑盒，其特征在于，包括如權(quán)利要求1所述的抗體捕獲劑。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括固相支持物、第一抗體、酶標記的第二抗體、封閉液、顯色液和終止液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述第一抗體為抗大口黑鱸IgM多克隆抗體。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述酶標記的第二抗體選自HRP標記的山羊抗兔IgG。

6.權(quán)利要求2至5任一項所述的試劑盒檢測大口黑鱸虹彩病毒抗體的方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)固相包被：將固相支持物先用所述抗體捕獲劑包被，再用封閉液封閉；

2)加樣：加入稀釋后待測樣品；

3)加第一抗體：加入稀釋后的第一抗體；

4)加酶標記的第二抗體：加入稀釋后的酶標記的第二抗體；

5)顯色：加入顯色液；

6)終止：加入終止液；

7)檢測并判定：將步驟6)得到的最終樣品液用酶標儀測OD_450nm值，判斷結(jié)果；

上述方法不用于疾病的診斷和治療。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，還包括陽性對照試驗和陰性對照試驗；當進行陽性對照試驗時，將步驟2)中的待測樣品替換為陽性對照品；當進行陰性對照試驗時，將步驟2)中的待測樣品替換為陰性對照品。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，P/N3時，試驗結(jié)果成立；S≥2.1×N時，判定為陽性；其中，P為陽性對照OD_450nm值，N為陰性對照OD_450nm值，S為待測樣品OD_450nm值；當N不足0.05時，按0.05計。

9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述陽性對照品為LBMV 滅活病毒免疫大口黑鱸后制備的抗體；所述陰性對照品為不含LBMV抗體的大口黑鱸血清。

10.權(quán)利要求1所述的抗體捕獲劑在制備檢測大口黑鱸虹彩病毒抗體的試劑中的用途。