[發(fā)明專利]用于防治黃瓜枯萎病的芽孢桿菌菌劑及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011598020.5
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN114456966B
• 公開（公告）日: 2023-08-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李潔明;任莉;李季;呂貽忠
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P3/00;A01P21/00;C12R1/125;C12R1/07
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 張璐

本發(fā)明涉及微生物制劑領(lǐng)域，具體涉及用于防治黃瓜枯萎病的芽孢桿菌菌劑及其制備方法和應(yīng)用。所述的芽孢桿菌菌劑包括枯草芽孢桿菌ZR?2，其保藏編號為CGMCC?NO.21124；和，解淀粉芽孢桿菌ZR?3，其保藏編號為CGMCC?NO.21123。本發(fā)明中的芽孢桿菌菌劑可用于防治黃瓜枯萎病，能夠防治黃瓜病害，同時，還可以促進(jìn)黃瓜種子萌發(fā)和幼苗生長，有利于黃瓜增產(chǎn)增收。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物制劑領(lǐng)域，具體涉及用于防治黃瓜枯萎病的芽孢桿菌菌劑及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

黃瓜枯萎病是黃瓜生產(chǎn)上的重要病害之一，是典型的土傳病害，全國各地均有發(fā)生，吉林、遼寧、山東、湖北、北京等省市發(fā)生尤為嚴(yán)重，發(fā)病率一般在10％～30％，嚴(yán)重時可達(dá)80％～90％，是制約黃瓜產(chǎn)量和品質(zhì)的重要因素。近年來，隨著張家口地區(qū)大棚蔬菜的迅速發(fā)展，復(fù)種指數(shù)增加，黃瓜枯萎病發(fā)生越發(fā)嚴(yán)重，給黃瓜生產(chǎn)造成極大的損失。黃瓜枯萎病菌從植株根部的傷口或根尖侵入，在維管束內(nèi)生長發(fā)育，堵塞導(dǎo)管，阻礙水分和無機(jī)鹽的運輸，分泌毒素引起植株萎蔫死亡，病情發(fā)展迅速，而且呈逐年加重趨勢，化學(xué)防治會形成二次污染，會對人身體健康造成不良影響，因此篩選生防菌劑對有效防控黃瓜枯萎病具有重要意義。

CN?104560837A中提到了一種解淀粉芽孢桿菌，并提到其可與其他具有抑菌作用的芽孢桿菌、霉菌等組合成復(fù)合微生物制劑，對白粉病、灰霉病、褐斑病、果腐病等植物病害的防治效率達(dá)到85％-90％。但其并未提供對黃瓜枯萎病的防治試驗及效果數(shù)據(jù)，而黃瓜枯萎病與其所驗證的植物病害的致病機(jī)理存在實質(zhì)差異。而CN?101531971A中提到了一種枯草芽孢桿菌M-2菌株，其是分離于海洋紅樹植物的根際促生菌，能夠抑制黃瓜枯萎病病菌、番茄根腐病病菌、大豆根腐病病菌等多種有害真菌的生長。但其并未提到對黃瓜種子萌發(fā)和幼苗生長的作用，尤其是并未提到對黃瓜種子萌發(fā)所具有的作用。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述不足，本發(fā)明從305個不同屬、種中篩選出最佳穩(wěn)定共生菌種組合，通過單獨培養(yǎng)篩選高產(chǎn)菌種，最終篩選出的菌種為枯草芽孢桿菌ZR-2(Bacillus?subtilis)、解淀粉芽孢桿菌ZR-3(Bacillus?amyloliquefaciens)。并基于上述發(fā)現(xiàn)，提供了用于防治黃瓜枯萎病的芽孢桿菌菌劑及其制備方法和應(yīng)用。

具體而言，本發(fā)明首先提供枯草芽孢桿菌ZR-2，其保藏編號為CGMCC?NO.21124，分類命名為：枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)，保藏時間是2020年11月06日。同時提供解淀粉芽孢桿菌ZR-3，其保藏編號為CGMCC?NO.21123，分類命名為：解淀粉芽孢桿菌(Bacillus?amyloliquefaciens)，保藏時間是2020年11月06日。兩株菌株的保藏單位為：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號；郵編為100101。

本發(fā)明進(jìn)一步提供一種芽孢桿菌菌劑，包括：

枯草芽孢桿菌ZR-2，其保藏編號為CGMCC?NO.21124；和，

解淀粉芽孢桿菌ZR-3，其保藏編號為CGMCC?NO.21123。

為了更有利于二者的協(xié)同效果，作為優(yōu)選，所述芽孢桿菌菌劑包括：

枯草芽孢桿菌ZR-2?1.5×10⁸-2.0×10¹⁰cfu/mL；

解淀粉芽孢桿菌ZR-3?3.5×10⁸-2.0×10¹⁰cfu/mL；

總菌數(shù)為2×10¹⁰-4×10¹⁰cfu/mL。

更優(yōu)選地，所述芽孢桿菌菌劑由如下組分組成：

枯草芽孢桿菌ZR-2?7.5×10⁹-1.0×10¹⁰cfu/mL；