[發明專利]熒光定量PCR檢測麻疹病毒、腮腺炎病毒和/或風疹病毒的方法

有效

• 申請號: 202011596013.1
• 申請日: 2020-12-28
• 公開（公告）號: CN113186186B
• 公開（公告）日: 2023-01-13
• 發明（設計）人: 宋陽;李娜;張燕;宋雪
• 申請（專利權）人: 北京民海生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/70;C12Q1/6851
• 代理公司: 北京華夏泰和知識產權代理有限公司 11662
• 代理人: 陰亮

公開了核苷酸序列，其選自：SEQ ID NO：1；SEQ ID NO：2；SEQ ID NO：3；SEQ ID NO：7；SEQ ID NO：8；SEQ ID NO：9；SEQ ID NO：16；SEQ ID NO：17；以及SEQ ID NO：18。

領域

本公開大體上涉及生物技術領域，更具體地，本公開涉及熒光定量PCR檢測領域。

背景

麻疹、腮腺炎和風疹(以下簡稱“麻腮風”)是由麻疹病毒、腮腺炎病毒和風疹病毒引起的重要病毒性傳染病，上述三個疾病均為兒童急性傳染病，對兒童的健康危害最大，被列入法定新發傳染病名單中。據國家衛生健康委員會官方數據統計，近年來每年新發病例數合計均在二十萬例以上，其中腮腺炎的占比最高。

疫苗免疫是預防麻腮風的重要措施。上世紀60年代開始，隨著生物技術和人們對于麻腮風的深入了解，陸續開發出相關減毒活疫苗預防該病，并取得良好的效果。由于3種疾病的接種群體和其他特性的原因，加之使用方便等原因，又進一步開發出麻腮風三聯活疫苗，并占據了市場的主導地位。

概述

一方面，本公開涉及核苷酸序列，其選自：SEQ ID NO:1；SEQ ID NO:2；SEQ ID NO:3；SEQ ID NO:7；SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:9；SEQ ID NO:16；SEQ ID NO:17；以及SEQ IDNO:18。

另一方面，本公開涉及探針，其選自：Cy5-SEQ ID NO:3-BHQ2；FAM-SEQ ID NO:9-BHQ2；以及VIC-SEQ ID NO:18-BHQ1。

再一方面，本公開涉及熒光定量PCR檢測麻疹病毒的方法，其包括使用SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2作為引物，以及使用Cy5-SEQ ID NO:3-BHQ2作為探針。

又一方面，本公開涉及熒光定量PCR檢測腮腺炎病毒的方法，其包括使用SEQ IDNO:7和SEQ ID NO:8作為引物，以及使用FAM-SEQ ID NO:9-BHQ2作為探針。

另一方面，本公開涉及熒光定量PCR檢測風疹病毒的方法，其包括使用SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:17作為引物，以及使用VIC-SEQ ID NO:18-BHQ1作為探針。

再一方面，本公開涉及熒光定量PCR檢測麻疹病毒、腮腺炎病毒和風疹病毒的方法，其包括使用SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:17作為引物，以及使用Cy5-SEQ ID NO:3-BHQ2、FAM-SEQ ID NO:9-BHQ2和VIC-SEQ ID NO:18-BHQ1作為探針。

又一方面，本公開涉及檢測麻疹病毒的方法，其包括：采用單層接種或混種接種的方式將細胞接種麻疹病毒；用低滲PBS裂解接種后的細胞將麻疹病毒從所述接種后的細胞中釋放；以及使用熒光定量PCR檢測麻疹病毒，其中使用SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2作為引物，以及使用Cy5-SEQ ID NO:3-BHQ2作為探針。

另一方面，本公開涉及檢測腮腺炎病毒的方法，其包括：采用單層接種或混種接種的方式將細胞接種腮腺炎病毒；用低滲PBS裂解接種后的細胞將腮腺炎病毒從所述接種后的細胞中釋放；以及使用熒光定量PCR檢測麻腮腺炎毒，其中使用SEQ ID NO:7和SEQ IDNO:8作為引物，以及使用FAM-SEQ ID NO:9-BHQ2作為探針。