[發(fā)明專利]一種尖孢鐮刀菌菌株及其在降解雞毛中的用途

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011595831.X
• 申請(qǐng)日: 2020-12-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112795488A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姚婷;張娜;甘卓亭;韓燕峰;梁宗琦
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 黃山學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/14
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/14;C12N1/02;C05G1/00;C05F11/08;C05F17/20;C12R1/77
• 代理公司: 貴陽(yáng)東圣專利商標(biāo)事務(wù)有限公司 52002
• 代理人: 袁慶云

本發(fā)明公開(kāi)了一種尖孢鐮刀菌菌株及其在降解雞毛中的用途，其形態(tài)特征：在PDA培養(yǎng)基上，培養(yǎng)14d，25℃，菌落直徑90 mm，白色，稀疏絨毛狀，隆起，背面中部紫色，其余白色至淡黃色，邊緣圓形。菌絲寬1.5?2.5μm，分隔，透明，光滑。分生孢子梗簡(jiǎn)單，短，瓶型至安培瓶形。大型分生孢子3?5隔，紡錘形，有時(shí)彎曲，20?45×3.5?5μm。小型分生孢子未見(jiàn)。厚垣孢子大量產(chǎn)生，單生或兩個(gè)連生，近球形，頂生或間生，光滑或略粗糙，7.5?12.5μm。本發(fā)明雞毛降解能力強(qiáng)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體來(lái)說(shuō)涉及一種尖孢鐮刀菌菌株，同時(shí)還涉及該尖孢鐮刀菌菌株在降解雞毛中的的用途。

背景技術(shù)

雞毛富含角蛋白，其粗蛋白含量在80%以上，是自然界中僅次于纖維素和幾丁質(zhì)的第三大豐富聚合物，主要由胱氨酸等20多種氨基酸以肽鍵作用結(jié)合在一起，形成相互高度交叉的長(zhǎng)鏈大分子，其中氫鍵、二硫鍵、鹽鍵和酯鍵等保持角蛋白的空間構(gòu)型而形成三維結(jié)構(gòu)，穩(wěn)定性很高，一般條件下都不能被溶解，也不能被一般的蛋白酶所水解。當(dāng)雞毛等角蛋白廢棄物自然堆積時(shí)，降解非常緩慢，易造成大量堆積，與此同時(shí)，很多人類(lèi)或動(dòng)物病原微生物能以雞毛角蛋白為碳氮源生長(zhǎng)而富集此類(lèi)真菌，從而引發(fā)對(duì)生態(tài)環(huán)境的二次污染及對(duì)人類(lèi)健康造成危害。畜禽類(lèi)羽毛資源的利用受到阻礙并被大量浪費(fèi)，通常對(duì)于這類(lèi)資源會(huì)采用填埋、焚燒等方式進(jìn)行處理，但焚燒會(huì)對(duì)環(huán)境和人體健康帶來(lái)安全隱患，所以運(yùn)用綠色健康的方法來(lái)降解這些畜禽類(lèi)羽毛尤為重要。雞毛蛋白資源豐富，是豐富的蛋白質(zhì)或氨基酸來(lái)源，也是一種質(zhì)量穩(wěn)定、具有較高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的潛在優(yōu)質(zhì)蛋白源，可用于生產(chǎn)肥料、飼料、食品添加劑、農(nóng)藥和醫(yī)藥、包覆膜材料以及生物醫(yī)學(xué)材料等等。利用微生物降解雞毛是一種溫和、高效、綠色的方法，具有廣闊的發(fā)展?jié)摿蜆O高的實(shí)用價(jià)值。常用的微生物降解雞毛主要是細(xì)菌、酵母及絲狀真菌。在中國(guó)專利申請(qǐng)中，涉及微生物角蛋白降解有6項(xiàng)發(fā)明專利，其降解菌株均為細(xì)菌。文獻(xiàn)中報(bào)道一些絲狀真菌也能很好降解雞毛，如板蠟蚧、淡紫擬青霉、毛癬菌和毀絲霉；而相比細(xì)菌，絲狀真菌在雞毛降解中具有諸多優(yōu)勢(shì)，如能產(chǎn)生豐富的降解酶系、高活性的角蛋白酶、更豐富和徹底的降解產(chǎn)物以及適宜溫度下降解效率高。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服上述缺點(diǎn)而提供的一種雞毛降解能力強(qiáng)的尖孢鐮刀菌菌株。

本發(fā)明的另一目的在于提供該尖孢鐮刀菌菌株在降解雞毛中的用途。

本發(fā)明的一種尖孢鐮刀菌菌株的分離方法，包括以下步驟：

1. 分離培養(yǎng)

1.1土樣的采集：采自云南省昆明市翠湖邊花壇土，采集深度為3-5cm，收集的土樣裝入無(wú)菌塑封袋中帶回實(shí)驗(yàn)室備用。

1.2 試驗(yàn)用培養(yǎng)基

馬丁氏PDA培養(yǎng)基：稱取削皮洗凈的馬鈴薯200克，切塊，水煮沸30min后過(guò)濾，收集濾液，加入葡萄糖20g，20g瓊脂粉，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝螅?21℃高壓滅菌30min后，冷卻至40℃左右，加入1%的滅菌孟加拉紅水溶液3mL，1%青霉素液3mL和1%鏈霉素液 3mL。

1.3菌株的富集與分離：將土壤樣品與10g雞毛粉混合置于培養(yǎng)皿中，保濕25℃恒溫培養(yǎng)1個(gè)月，待觀察到雞毛上長(zhǎng)有菌絲，在超凈工作臺(tái)中，將菌絲挑出至另一干凈培養(yǎng)皿中純化，培養(yǎng)5d，待單菌落長(zhǎng)出后轉(zhuǎn)移至新的PDA試管斜面培養(yǎng)基上保存，獲得純化菌株GZAC.YNCH2.2.2，保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4菌株的DNA提取和PCR擴(kuò)增