[發明專利]基于新冠病毒RBD與ACE2受體結合結構域篩選的表位肽抗原檢測中和抗體試劑盒

有效

• 申請號: 202011595065.7
• 申請日: 2020-12-28
• 公開（公告）號: CN113024640B
• 公開（公告）日: 2022-07-26
• 發明（設計）人: 徐建華;張嘉琪;劉萬里;王大偉;鄧敏;李宜哲;胡薇
• 申請（專利權）人: 廣州中醫藥大學順德醫院（佛山市順德區中醫院）
• 主分類號: C07K14/165
• 分類號: C07K14/165;C12N15/50;G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 段卉

本發明公開了一種基于新冠病毒RBD與ACE2受體結合結構域篩選的表位肽抗原檢測中和抗體試劑盒，其含有氨基酸序列如SEQ ID NO:1～4所示的基于新冠病毒RBD與ACE2受體結合結構域篩選的表位肽抗原。本發明采用ELISA技術對疫苗接種者及冠病毒感染患者體內中和抗體進行檢測，該方法理論可靠，實際可行，在準確性和重復性方面提供了可靠的結果，只需在二級生物安全實驗室就可完成。本發明的免疫分析技術靈敏度高、特異性強、操作簡單、結果重復性好、干擾因素少。該試劑盒可有效地監測臨床研究中的疫苗接種反應及作為后期疫苗效果的評價指標，并用于檢測新冠康復病人體內中和抗體含量，以判斷是否可以復工復產及是否存在再次感染風險。

技術領域

本發明涉及病毒技術領域，具體地，涉及基于新冠病毒RBD與ACE2受體結合結構域篩選的表位肽抗原檢測中和抗體試劑盒。

背景技術

新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)是一種新型β冠狀病毒(β-coronavirus)，來自Sarbecovirus亞屬，圓形或橢圓形，直徑60～140nm，電鏡下呈皇冠樣形狀。與SARS-CoV具有相似的受體結合結構域，依靠人細胞表面ACE2蛋白作為受體進入細胞。包膜刺突蛋白(S)介導受體結合和膜融合，同時也是抗體主要靶點。

新型冠狀病毒中和抗體是新型冠狀病毒肺炎患者在染病的數天或約一周后以及注射新冠疫苗后血液內產生的一種抗體。中和抗體(NAb)通常是針對S蛋白產生的，對病毒表面的S蛋白(spike protein)的受體結合域(receptor binding domain，RBD)表現出直接中和活性，阻止了刺突蛋白對表面ACE2受體的有效結合。在使用滅活病毒接種疫苗的方法中證明，SARS-CoV-2的S蛋白的受體結合結構域(RBD)是一種免疫優勢病毒抗原。

雖然分子檢測技術，如聚合酶鏈反應(PCR)和下一代測序在病毒的診斷和基因變化監測中發揮了重要作用，但還迫切需要可靠和多功能的血清學或抗體檢測。抗體檢測主要包括病毒中性化試驗(cVNT)、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和側流試驗(LFA)快速試驗。病毒中性化試驗(cVNT)可檢測病人血液中的中和抗體，但需要在三級生物安全實驗室中檢測，較為繁瑣費時。酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和側流試驗(LFA)快速試驗，檢測總結合抗體，因此無法區分總結合抗體和中和抗體。

中和抗體的檢測可強化監測措施，如普遍檢測、活動性病例發現、接觸者追蹤和聯系群集；此外，中和抗體檢測還能夠有效地監測臨床研究中的疫苗接種反應及作為疫苗效果的評價指標。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術的上述不足，提供基于新冠病毒RBD與ACE2受體結合結構域篩選的表位肽抗原檢測中和抗體試劑盒。

本發明的第一個目的是提供一種新冠病毒的表位肽。

本發明的第二個目的是提供一種新冠病毒的表位肽。

本發明的第三個目的是提供一種新冠病毒的表位肽。

本發明的第四個目的是提供一種新冠病毒的表位肽。

本發明的第五個目的是提供編碼任一所述表位肽的基因。

本發明的第六個目的是提供含有所述基因的載體。

本發明的第七個目的是提供含有所述載體的工程菌。

本發明的第八個目的是提供所述表位肽的任意一條或幾條、所述基因、所述載體、或所述工程菌中的一種或幾種在制備檢測新冠肺炎中和抗體檢測試劑盒中的應用。

本發明的第八個目的是提供一種新冠病毒中和抗體檢測試劑盒。

為了實現上述目的，本發明是通過以下方案予以實現的：