[發(fā)明專利]一種膠體金免疫層析微量全血檢測(cè)試紙及其檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011590524.2
• 申請(qǐng)日: 2020-12-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112763730B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-03-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 葉成棟;劉軍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 成都永安制藥有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/80
• 分類號(hào): G01N33/80;G01N33/58;G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 成都巾幗知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 51260
• 代理人: 邢偉

本發(fā)明公開(kāi)了一種膠體金免疫層析微量全血檢測(cè)試紙及其檢測(cè)方法，本發(fā)明提供的膠體金免疫層析微量全血檢測(cè)試紙?jiān)谇岸思訕樱袆e于傳統(tǒng)的后端加樣技術(shù)，同時(shí)在前端硝酸纖維素膜上增加微量全血濾膜，加微量全血后，微量全血通過(guò)處理的全血濾膜，血清滲入到硝酸纖維素膜上，紅細(xì)胞等滯留在全血濾膜上，起到快速分離紅細(xì)胞的作用，本發(fā)明試紙拓寬了微量全血的使用范圍和檢測(cè)效果，同時(shí)對(duì)血清、血漿亦可使用；本發(fā)明方法采集末梢血非常容易，創(chuàng)傷小，供血者的體驗(yàn)也輕松，檢測(cè)方法簡(jiǎn)便快速且結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于檢疫檢驗(yàn)測(cè)試領(lǐng)域，具體涉及一種膠體金免疫層析微量全血檢測(cè)試紙及其檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

免疫膠體金技術(shù)的基本原理是：氯金酸在還原劑作用下，可聚合成一定大小的金顆粒，形成疏水膠體溶液。由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，故稱膠體金。膠體金標(biāo)記，實(shí)質(zhì)上是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過(guò)程。其吸附原理一般認(rèn)為由于金顆粒表面的負(fù)電荷與蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)之間的靜電作用-非共價(jià)鍵的范德華引力而相互吸收，而且這種靜電引力較小而一般不影響蛋白質(zhì)的活性。

用化學(xué)還原法可以方便地制備各種不同粒徑、也就是不同顏色的膠體金顆粒。這種球形的粒子對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的吸附功能，可以與單克隆抗體、多克隆抗體、葡萄球菌A蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白、多肽綴合物等非共價(jià)結(jié)合，因而在基礎(chǔ)研究和臨床檢測(cè)中成為非常有用的工具。疫膠體金技術(shù)與放射免疫和酶聯(lián)免疫相比有著許多優(yōu)越性。首先，它不需要酶聯(lián)免疫法中所要求的底物，因而可省去一些操作步驟，如洗滌、終止等，使操作簡(jiǎn)單化；其次，膠體金無(wú)污染，不會(huì)危害操作者、以及污染環(huán)境，而這些問(wèn)題在酶免疫法與放免法中常遇到；再次膠體金檢測(cè)試劑通常室溫儲(chǔ)存相當(dāng)穩(wěn)定，即該類制品儲(chǔ)存條件溫和，效期遠(yuǎn)長(zhǎng)于酶免法和放免法；此外膠體金技術(shù)還具有檢測(cè)迅速、不需要復(fù)雜儀器設(shè)備、產(chǎn)物顯色永久等優(yōu)點(diǎn)。

在傳統(tǒng)的檢測(cè)過(guò)程中，血樣的檢測(cè)樣本往往在50μL以上，如采用末梢血取50μL及以上，往往擠壓末梢部位造成采樣人的痛苦。而采用抽取靜脈血，則需要專業(yè)的護(hù)士，相對(duì)末梢血的取樣創(chuàng)傷性和可操作性都有所增加。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種膠體金免疫層析微量全血檢測(cè)試紙及其檢測(cè)方法。

本發(fā)明的目的通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：一種膠體金免疫層析微量全血檢測(cè)試紙，它由PVC底板、玻璃纖維素膜、金結(jié)合墊、T線、C線、硝酸纖維素膜、微量全血濾膜和吸水紙組成，所述玻璃纖維素膜位于PVC底板的左側(cè)，吸水紙位于PVC底板的右側(cè)，硝酸纖維素膜位于PVC底板上，金結(jié)合墊的右側(cè)位于硝酸纖維素膜上表面的左側(cè)，金結(jié)合墊的左側(cè)延伸到玻璃纖維素膜的右下方，吸水紙的左側(cè)位于硝酸纖維素膜上表面的右側(cè)，所述硝酸纖維素膜的上表面從左到右依次設(shè)置有T線和C線，硝酸纖維素膜上設(shè)置有微量全血濾膜，微量全血濾膜位于金結(jié)合墊和T線之間且左側(cè)延伸至金結(jié)合墊的右下方，微量全血濾膜是采用以下處理液處理的孔徑為4-8μm無(wú)背襯的硝酸纖維素膜，所述處理液包括下述重量份的原料：磷酸氫二鈉：0.29-1.16，磷酸二氫鉀：0.026-0.104，氯化鈉：1.5-6；表面活性劑S9：0.25-1。

進(jìn)一步地，所述微量全血濾膜(8)為Millipore135型號(hào)。

進(jìn)一步地，所述C線使用1-2mg/mL的鼠抗人二抗劃線。

進(jìn)一步地，所述微量全血濾膜采用以下方法處理：

S1.稱量：按上述配方比例稱取各原料，并將磷酸氫二鈉和磷酸二氫鉀均分為兩份，備用；

S2.制備處理液：包括處理液1的制備和處理液2的制備；

處理液1的制備：PB溶液中加入氯化鈉和表面活性劑S9并混合均勻；

處理液2的制備：取磷酸氫二鈉和磷酸二氫鉀配制成PB溶液；