[發明專利]一種利用核酸快速篩選聯合抗體檢測的肺癌快速檢測試劑盒

有效

• 申請號: 202011589496.2
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN112646889B
• 公開（公告）日: 2021-08-20
• 發明（設計）人: 張海濤;王振
• 申請（專利權）人: 上海奕檢醫學檢驗實驗室有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11;C07K16/30;G01N33/574;G01N33/577
• 代理公司: 深圳市蘭鋒盛世知識產權代理有限公司 44504
• 代理人: 羅炳鋒

本發明涉及一種利用核酸快速篩選聯合抗體檢測的肺癌快速檢測試劑盒，該試劑盒包括通過核酸檢測和抗體聯合檢測，二者組合使用能夠高效的篩選肺癌，具有時間短，成本低，見效快的效果，適用于醫學上的快速篩選。

技術領域

本發明涉及檢測領域，更具體的涉及一種利用核酸快速篩選以及抗體檢測的肺癌檢測試劑盒。

背景技術

肺癌是世界上發病率最高的腫瘤之一，占男性腫瘤發病率和死亡率首位，全世界肺癌的死亡率高達85％，嚴重威脅著患者的生命安全。肺癌早期癥狀通常較輕微，甚至可無任何不適，而一旦發覺往往是晚期，已錯過了最佳的治療時機，預后多因此不良。雖然隨著近年來臨床診斷技術與治療技術不斷改進與提高，肺癌診斷和治療現狀有所改善，主要從以下方面進行檢測。

CTCs是由原發腫瘤細胞脫落到循環血液中形成，它具有原發性腫瘤的特征，是潛在的生物標志物。CTCs可以作為療效評測指標。在一項研究中，非小細胞肺癌(NSCLC)放療前檢測了CTCs數量，隨著放療后腫瘤縮小，CTCs數量也減少，表明CTCs可以作為放療療效評測指標。CTCs也可作為預后指標。有研究報道，V期的cTcs數量高于Ⅲ期患者，且治療前較少CTCs的患者治療后的總生存期和無進展生存期更長，表明CTCs是潛在的預后指標。CTCs作為活的腫瘤細胞實體，可提供突變和藥物敏感性分析變化。其細胞的完整性可進行細胞水平的研究，從DNA、 RNA、表觀遺傳學等方面提供信息。

人體的血液中存在血漿游離DNA(cfDNA)，其中攜帶腫瘤特有突變信息的成為ctDNA。ctDNA來源于壞死的或者凋亡的腫瘤細胞。研究表明，ctDNA可以用來重建腫瘤基因。Qiu等指出，ctDNA是表皮生長因子受體(EGFR)基因突變狀態檢測中具有高特異性和有效性的生物標志物，ctDNA的分析將是非小細胞肺癌的個性化癌癥治療的一個關鍵部分。Nie等指出，許多基因的改變，如基因突變、雜合性缺失、微衛星不穩定性和基因甲基化，均可在非小細胞肺癌患者ctDNA中發現。因此這些結果表明ctDNA可以作為一個可行的工具來監測NSCLC。研究表明，ctDNA 檢測腫瘤變異比CTcs有更高的敏感性。目前ctDNA被CFDA推薦用于晚期NSCLC中血漿EGFR的檢測。最近研究表明ctDNA涵蓋腫瘤整體突變信息，比局部組織活檢更具有惡性整體表現。其攜帶某種腫瘤特異性突變或其他基因組改變信息，可用于早期篩查，表現為假陽性低，特異性好，可攜帶腫瘤細胞的體細胞突變。

miRNA是在真核生物中發現的一類內源性的具有調控功能的非編碼RNA，其大小長約20～25個核苷酸。成熟的miRNA形成RNA誘導的沉默復合體，通過堿基互補配對的方式識別靶mRNA，并根據互補程度的不同指導沉默復合體降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻譯。不同的miRNA在不同肺癌類型中起不同的作用。有研究報道，在NSCLC中起到致癌作用的有miR-21、miR-17/92、miR-31、miR-224等，在NSCLC 中起到抑癌作用的有let-7、miR34b。miR-25在小細胞肺癌(SCLC)中起致癌作用，在SCLC中起抑癌作用的有miR-34、miR138、miR-126。方楚玲等綜述了miRNA對肺癌化療耐藥的調控，提出：miRNA與藥物轉運相關，如miR-495與順鉑藥物敏感性增加有關；miRNA與細胞損傷后自我修復能力有關，如miR-138與ERCCL的mRNA結合導致順鉑敏感性增加；miR—NA調控細胞凋亡相關基因，如miR-135a與APC的 mRNA結合，導致紫杉醇耐受¨1；miRNA與上皮細胞間質化有關，如miR200家族。在不同組織、不同發育階段中miRNA的水平有顯著差異，這種miRNA表達模式具有分化的位相性和時序性，提示miRNA有可能作為參與調控基因表達的分子，因而具有重要意義。