[發明專利]miR-novel-0287-3p及其在防治害蟲中的應用

有效

• 申請號: 202011587560.3
• 申請日: 2020-12-28
• 公開（公告）號: CN112616859B
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發明（設計）人: 鄭思春;曹曉聰;馬康
• 申請（專利權）人: 華南師范大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 景鵬

本發明涉及生物技術領域，特別涉及一種miR?novel?0287?3p及其在害蟲防治中的應用。提供了所述miR?novel?0287?3p或其模擬物或其激動劑在防治害蟲或制備防治害蟲的產品或制備GSTe1抑制劑中的應用。miR?novel?m0287?3p能抑制蟲體內用于抵御植物次生物質所需的解毒酶和調控蛻皮的蛻皮激素受體的表達，從而減緩蟲體生長發育，最終導致蟲體延緩蛻皮及化蛹，甚至有畸形蛹的產生。因此可將昆蟲miRNA novel?m0287?3p用于殺蟲劑的制備，或制備表達novel?m0287?3p的轉基因植物進行害蟲防治。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，特別涉及一種miR-novel-0287-3p及其在害蟲防治中的應用。

背景技術

MicroRNA(miRNA)為20世紀90年代發現的一類內源性的非編碼RNA(Lee RC,Feinbaum RL,Ambros V.The C.elegans heterochronic gene lin-4 encodes smallRNAs with antisense complementarity to lin-14.Cell,1993,75(5):843-54.)，約22個核苷酸的單鏈小RNA，由細胞內源產生的發卡結構轉錄本加工而來。絕大多數miRNA的轉錄是由RNA聚合酶Ⅱ介導的，少數由RNA聚合酶Ⅲ介導，形成長度為幾百甚至上千個堿基的初級轉錄本(pri-miRNA)，其中pri-miRNA的具有5’端帽子結構和poly(A)尾巴，內部有莖環結構。pri-miRNA于細胞核內在RNase III的作用下，被剪切生成miRNA前體(pre-miRNA)。前體miRNA通過Ran-GTP介導的輸出蛋白-5蛋白轉運到細胞質中(Bartel DP.MicroRNAs：genomics,biogenesis,mechanism,and function.Cell,2004,Vol.116(2):281-297)。接下來，這個雙鏈RNA會被裝載到Ago蛋白中，以便形成最終發揮作用的RISC復合物。之后會發生一個鏈選擇的過程：選擇哪一條鏈被保留在RISC中去行使功能，哪一條鏈被丟棄。這個選擇的基本原則是：兩條鏈里，雙鏈5端相對更不穩定的那一條鏈傾向于被保留，而另一條鏈則會被丟棄然后降解。當然，這一規則并不嚴格，導致有的雙鏈的兩條鏈都可能被保留下來，這種時候需要在miRNA的序號后面加上5p或者3p加以區分。

miRNA會通過其種子序列(5’端第2-8位核苷酸)識別靶基因mRNA 3’-UTR上的結合位點，攜帶RISC發揮作用。miRNA作用效果主要包括三點：轉錄抑制與mRNA的切割或降解。miRNA與靶mRNA的3’UTR不完全互補配對進而破壞靶基因mRNA轉錄本的穩定性，從而達到抑制核糖體翻譯的目的。mRNA的切割需要miRNA與靶基因盡可能地完美匹配。而降解作用則是可能引發mRNA的脫帽、脫尾反應，使mRNA的結構被破壞，導致mRNA失去保護而迅速被核酸外切酶降解。大量的研究工作表明，miRNA具有調控生物體生長和發育，細胞分化和凋亡，激素的分泌和信號的傳導以及應答各種脅迫等作用。但是在昆蟲與植物關系中的重要miRNA仍沒見有報道。

斜紋夜蛾(Spodoptera litura Fabricius)又名蓮紋夜蛾，屬鱗翅目夜蛾科，是一種食性雜、分布較廣、對農林業危害嚴重的間歇性發生的世界性害蟲。目前，對于斜紋夜蛾的防治包括：農業防治、物理防治、生物防治和化學防治。其中，農業防治和物理防治工作量大、效率較低，化學防治容易使害蟲產生抗藥性，并且會對環境產生污染。而生物防治中，涉及分子機制及miRNA作用的研究極少。

發明內容

本發明旨在至少解決現有技術中存在的技術問題之一。為此，提供了一種miRNA及其在害蟲防治中的應用。