[發明專利]一種咖啡抗寒性的鑒定方法

在審

• 申請號: 202011585938.6
• 申請日: 2020-12-28
• 公開（公告）號: CN112816426A
• 公開（公告）日: 2021-05-18
• 發明（設計）人: 黃麗芳;閆林;王曉陽;董云萍;龍宇宙;孫燕;林興軍;譚軍
• 申請（專利權）人: 中國熱帶農業科學院香料飲料研究所
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/78
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 劉猛

本發明涉及植物種質資源鑒定技術領域，公開了一種咖啡抗寒性的鑒定方法。本發明所述鑒定方法采用低溫處理后的咖啡葉片，用隸屬函數法對得到的葉片的電導率、過氧化氫酶含量、可溶性糖含量和可溶性蛋白含量進行綜合抗寒性評價，得到不同咖啡種質資源的抗寒隸屬函數值Uij；通過得到的抗寒隸屬函數值Uij來判斷咖啡資源的抗寒性。本發明依據隸屬函數法建立了一種多指標的綜合評價體系，能在早期有效鑒定咖啡的抗寒性。本發明鑒定方法適用于自然降溫過程田間不同咖啡資源早期抗寒性鑒定與評價的技術體系，與咖啡植區冬季田間抗寒鑒定結果相吻合，該方法對于咖啡不同種質資源的利用，種植地點的合理規劃布局和抗寒育種均具有重要的意義。

技術領域

本發明涉及植物種質資源鑒定技術領域，具體涉及一種咖啡抗寒性的鑒定方法。

背景技術

咖啡是世界三大飲料作物之首，原產于熱帶地區，適宜生長在平均溫度18～25℃氣候環境下。中國咖啡主產區為海南、云南，海南以中粒種咖啡為主，云南以小粒種咖啡為主。全國咖啡種植面積約210萬畝，產量為15萬噸，總產值約為21億元。因我國熱區地處熱帶北緣，冬季常有低溫危害，通常限制了咖啡的開花、座果、引起咖啡顆粒過小、不飽滿、缺陷豆比例上升，影響咖啡的產量和品質，嚴重的可導致植株的死亡。因此提高咖啡抗寒性，使咖啡安全越冬至關重要。

其中，選育抗寒良種，利用咖啡自身的遺傳因素來抵御低溫脅迫是最根本的途徑。而抗寒良種選育的關鍵則是種質資源抗寒性的早期鑒定。目前，鑒定咖啡抗寒性強弱最可靠的方法是直接鑒定法。即當試驗地遭遇嚴寒時，實地進行觀測和比較鑒定。但直接鑒定成本較高，受自然環境限制較大。因此，如何對咖啡種質資源進行苗期抗寒性準確、快速鑒定，成為生產中亟待解決的技術問題。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種咖啡種質資源苗期抗寒性的鑒定方法，使得所述鑒定方法通過多指標的綜合評價體系，在早期有效鑒定與評價咖啡的抗寒性。

為了實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種咖啡抗寒性的鑒定方法，包括：

步驟1、獲得咖啡幼苗的第二至第四片完全展開成熟葉片；分為低溫處理組和對照組；

步驟2、將步驟1獲得的葉片進行相對電導率、過氧化氫酶含量、可溶性糖含量和可溶性蛋白含量四個指標的檢測；

步驟3、相對電導率按照反隸屬函數Uij＝1–(Xij–Xjmin)/(Xjmax–Xjmin)計算抗寒隸屬函數值，過氧化氫酶含量、可溶性糖含量和可溶性蛋白含量按照正隸屬函數Uij＝(Xij–Xjmin)/(Xjmax–Xjmin)計算抗寒隸屬函數值，最后統計平均抗寒隸屬函數值作為平均隸屬度鑒定咖啡品種的抗寒性，所述平均隸屬度越高，咖啡品種的抗寒性越高；

其中，Uij表示i品種j指標的抗寒隸屬函數值；Xij表示i品種j指標的測定值；Xjmin表示兩個組中所有品種j指標的最小值；Xjmax表示兩個組中所有品種j指標的最大值；i表示某個品種；j表示某項指標。

作為優選，所述低溫為0-10℃；更優選地，所述低溫為0-8℃；在本發明具體實施方式中，所述低溫為8℃。優選地，低溫處理的時間為2-3d。

咖啡幼苗的第一片葉片較為幼嫩，而第四以下的葉太老，為了鑒定結果的誤差較小，本發明第采用第二至第四片屬于成熟穩定的葉片。對于本領域技術人員來講其能夠理解咖啡幼苗的第二至第四片完全展開成熟葉片的含義，但本發明為了能夠更加形象的描述葉片順序，本發明提供了圖1所示的示意圖來展示。在本發明具體實施方式中，本發明選擇5-7月齡的咖啡幼苗，更具體地是6月齡咖啡幼苗。

在本發明中，所述咖啡幼苗的種植方法如下：

采集咖啡果實，將咖啡果實脫皮后用水浸泡，然后脫膠、水洗晾干；晾干后的種子以砂和椰糠為基質播種，當咖啡苗長至兩葉一心時進行裝袋移栽。