[發(fā)明專利]油包水型復(fù)合佐劑及其制備方法和應(yīng)用、疫苗的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011585496.5
• 申請日: 2020-12-28
• 公開（公告）號: CN112641939A
• 公開（公告）日: 2021-04-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳宏;崔凱;王博;胡海洋;趙海源;馮玉強;李洋;金燕斌;楊柳;李莉;朱長動;趙博;孫佰強;宋海巖;付志鵬;程杰;周宏宇
• 申請（專利權(quán)）人: 吉林冠界生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61P37/04;A61K39/145;A61P31/16
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 陳露

本發(fā)明提供了一種油包水型復(fù)合佐劑及其制備方法和應(yīng)用、疫苗的制備方法，涉及生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供的油包水型復(fù)合佐劑，按質(zhì)量百分比計，包括白油79％～89％、親水乳化劑3％～6％和親油乳化劑8％～15％，其中白油為法國道達爾EOLANE150白油，穩(wěn)定性好，碳鏈長度分布集中，應(yīng)激小、安全性高；以特定比例的白油、親水乳化劑和親油乳化劑制備得到的油包水型復(fù)合佐劑的環(huán)烷基含量高，易于機體吸收；正異構(gòu)比例適中，以其為原料制備得到疫苗的效價高且持續(xù)時間長。本發(fā)明提供的疫苗的制備方法簡單，制備得到的疫苗穩(wěn)定性好，保存時間長，免疫后抗體持續(xù)期長；黏度低，更易于注射；免疫后副反應(yīng)低，免疫應(yīng)答水平高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種油包水型復(fù)合佐劑及其制備方法和應(yīng)用、疫苗的制備方法。

背景技術(shù)

所謂佐劑就是當一種抗原物質(zhì)先于抗原或與抗原混合或同時注射于動物體內(nèi)，能非特異性地改變或增強機體對該抗原的特異性免疫應(yīng)答，并能在免疫反應(yīng)中誘導(dǎo)全面持久的免疫應(yīng)答。在疫苗制劑中，佐劑的功能主要包括：增強疫苗抗原的免疫原性；促進細胞免疫和體液免疫，優(yōu)化免疫應(yīng)答；增進抗原與黏膜之間的傳遞以及免疫接觸；減少疫苗成分中抗原的需求量以及在實施過程中的免疫接種次數(shù)；優(yōu)化抗原結(jié)構(gòu)，維持抗原構(gòu)象等。滅活疫苗尤其是病毒滅活疫苗因其抗原分子小、免疫原性不強，不能引起足夠強的免疫應(yīng)答，需要佐劑輔助刺激機體才能產(chǎn)生較強的免疫應(yīng)答，礦物油佐劑加入疫苗制劑后能促進、增強或延長機體對抗原特異性免疫應(yīng)答，效果遠遠優(yōu)于水質(zhì)佐劑，這也是口蹄疫滅活疫苗、禽流感滅活疫苗等一直使用油佐劑的原因所在。油佐劑疫苗按照劑型又分可為水包油型(O/W)、油包水型(W/O)、水包油包水型(W/O/W)，有些還包含其他免疫刺激性物質(zhì)，而油包水劑型(W/O)有著免疫持續(xù)期長、兼顧體液免疫和細胞免疫、成本低廉等諸多優(yōu)勢，所以在滅活疫苗上廣泛應(yīng)用，特別是禽用滅活疫苗。

然而，現(xiàn)有的油包水型(W/O)疫苗的制備過程較為繁瑣，批間受到礦物油品種以及乳化劑的加入等諸多因素影響差異較大。一方面，需要在抗原內(nèi)加入親水性的乳化劑，吐溫-80等；還需要在礦物油中加入親油性的乳化劑和助懸劑，如司盤-80、硬脂酸鋁等，諸多原料的加入造成操作的繁瑣，進而使疫苗的質(zhì)量把控較為困難。而硬脂酸鋁的溶解性較差，必須通過加熱至100℃以上才能充分溶解，這使得佐劑的除菌方式較為單一，只能采用高溫滅菌的方法實現(xiàn)，而無法采用過濾除菌等其它更為簡易的方式，而硬脂酸鋁本身帶有一定毒性，這在使用過程中也有一定的安全隱患；另一方面，諸多物質(zhì)的加入也給疫苗最終的劑型、黏度、穩(wěn)定性等指標帶來更多的不可控因素，可能會造成疫苗質(zhì)量的不穩(wěn)定。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的在于提供一種油包水型復(fù)合佐劑，以緩解現(xiàn)有技術(shù)中存在的佐劑滅菌方式單一，批間差異大，使用方法繁瑣的技術(shù)問題。

本發(fā)明的第二目的在于提供一種油包水型復(fù)合佐劑的制備方法，該方法簡單方便。

本發(fā)明的第三目的在于提供一種油包水型復(fù)合佐劑在制備疫苗中的應(yīng)用。

本發(fā)明的第四目的在于提供一種疫苗的制備方法，該方法操作簡單，制備得到的疫苗黏度小，易于注射，穩(wěn)定性好，有效抗體持續(xù)時間長，副反應(yīng)小。

為了解決上述技術(shù)問題，特采用以下技術(shù)方案：

第一方面，本發(fā)明提供了一種油包水型復(fù)合佐劑，包括按質(zhì)量百分比計的如下組分：白油79％～89％、親水乳化劑3％～6％和親油乳化劑8％～15％；

所述白油為法國道達爾EOLANE150白油。

作為進一步技術(shù)方案，包括按質(zhì)量百分比計的如下組分：白油83％-89％、親水乳化劑3％-5％和親油乳化劑8％-12％。

作為進一步技術(shù)方案，包括按質(zhì)量百分比計的如下組分：白油89％、親水乳化劑3％和親油乳化劑8％。

作為進一步技術(shù)方案，所述親水乳化劑包括吐溫-80和/或吐溫-85。