[發(fā)明專利]一種菊花轉(zhuǎn)基因方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011583612.X
• 申請(qǐng)日: 2020-12-28
• 公開（公告）號(hào): CN112626108B
• 公開（公告）日: 2023-02-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉華;黃叢林;陳筱溪;陳海霞;郭雙;羅昌;陳東亮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京市農(nóng)林科學(xué)院
• 主分類號(hào): C12N15/82
• 分類號(hào): C12N15/82;C12N5/04;A01H5/02;A01H5/10;A01H6/14
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 孫怡

1.一種菊花轉(zhuǎn)基因方法，通過花粉管通道轉(zhuǎn)化外源DNA，其特征在于，將結(jié)合有待轉(zhuǎn)入基因的納米磁珠與花粉在花粉培養(yǎng)液中進(jìn)行轉(zhuǎn)染，所述花粉培養(yǎng)液包括：130-200g/L蔗糖、130-170mg/L MgSO₄· 7H₂O、100-120mg/L H₃BO₃、200-220mg/L KNO₃、35-55mg/L KCl、120-130mg/L Ca(NO₃)₂· 4H₂O、360-370mg/L MnSO₄· H₂O、7.20-7.30mg/L Na2EDTA、0.2-0.25mg/L Na₂MoO₄· 2H₂O、20-30mg/L GA3。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述花粉培養(yǎng)液的配方如下：150g/L蔗糖、150mg/L MgSO₄· 7H₂O、110mg/L H₃BO₃、210mg/L KNO₃、40mg/L KCl、125mg/L Ca(NO₃)₂·4H₂O、365mg/L MnSO₄· H₂O、7.25mg/L Na2EDTA、0.23mg/L Na₂MoO₄· 2H₂O、25mg/L GA3。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，納米磁珠與待轉(zhuǎn)入基因的質(zhì)粒的質(zhì)量比為1:(3.5-4.5)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述菊花轉(zhuǎn)基因方法具體包括：

(1)將納米磁珠和待轉(zhuǎn)入基因的質(zhì)粒混勻，室溫結(jié)合半小時(shí)；

(2)將結(jié)合好的磁珠-DNA混合物重懸于所述花粉培養(yǎng)液中；

(3)收集剛散粉的新鮮花粉，過篩，加入含有磁珠-DNA混合物的花粉培養(yǎng)液中充分浸沒，置于磁板上室溫靜置半小時(shí)；

(4)將磁轉(zhuǎn)化后的花粉進(jìn)行干燥后進(jìn)行授粉。

5.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的方法在菊屬及其近緣種屬的植物基因工程育種中的應(yīng)用。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述菊屬的近緣種屬為亞菊屬、太行菊屬或向日葵屬。