[發(fā)明專利]一種提高細毛羊羊毛同質(zhì)性的分子育種方法

有效

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• 申請日: 2020-12-28
• 公開（公告）號: CN114686598B
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄧學(xué)梅;王建魁;華國營;陳建飛;馬宇浩;張媛媛;楊雪;李錦南;蔡甘先;張冰潔
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858;A01K67/02
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 何葉喧

本發(fā)明公開了一種提高細毛羊羊毛同質(zhì)性的分子育種方法。本發(fā)明提供了一種鑒定綿羊的GTL2?REs基因型的方法：(1)以供試綿羊的基因組DNA為模板，采用序列1所示引物F1和序列2所示引物R1組成的引物對進行PCR擴增；(2)將產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳，如果顯示單一特征帶、該綿羊為GTL2?REs純合基因型，如果顯示兩條特征帶、該綿羊為GTL2?REs雜合基因型。本發(fā)明還提供了繁育具有同質(zhì)毛性狀的綿羊的方法，包括如下步驟：將GTL2?REs雜合基因型的母綿羊作為母本，將GTL2?REs純合基因型的公綿羊作為父本，獲得后代。本發(fā)明的方法可用于細毛羊同質(zhì)毛的培育過程中，為防止幼齡異質(zhì)毛后代的產(chǎn)生提供了新的分子育種方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種提高細毛羊羊毛同質(zhì)性的分子育種方法，具體來說涉及綿羊GTL2-Mirg一段重復(fù)序列的不同基因型在毛用細毛羊羊毛同質(zhì)性選育中的應(yīng)用，可用于綿羊育種。

背景技術(shù)

細毛羊育種中，羊毛纖維的同質(zhì)性至關(guān)重要。細毛羊的毛囊以次級毛囊為主，也會有少量的初級毛囊，特別是在出生羔羊中，部分羔羊出現(xiàn)明顯較多數(shù)量的初級毛囊。初級毛囊生出的毛發(fā)多為有髓毛，毛質(zhì)變硬，毛直徑變粗，嚴重影響羊毛的品質(zhì)。同質(zhì)毛是毛紡工業(yè)對羊毛原料要求的前提，在細毛羊育種中要求被毛首先達到同質(zhì)，在這個基礎(chǔ)上再進一步要求羊毛綜合品質(zhì)的提高。近年來，由于羊毛與羊肉比價變化，肉價的提高促使羊毛的選擇強度降低，更嚴重的是，在細毛羊產(chǎn)區(qū)逐漸出現(xiàn)的“倒改”趨勢，也就是用本地粗毛公羊與細毛羊雜交，直接影響了后代的羊毛同質(zhì)性。“倒改”導(dǎo)致優(yōu)良性狀的保持愈加困難，使得本就不能滿足國內(nèi)羊毛精加工的需求的優(yōu)質(zhì)細羊毛產(chǎn)量進一步降低，最終導(dǎo)致國內(nèi)毛紡企業(yè)對于高品質(zhì)羊毛的需求嚴重依賴進口。

在細毛羊的實際育種過程中，為了提高同質(zhì)毛羊的比例，人們往往采取淘汰異質(zhì)毛綿羊個體的選種方法，但實際上這種剔除方式不能達到完全的凈化效果，事實上，在美利奴細毛羊品種中也始終沒有完全剔除出生羔羊的異質(zhì)毛型現(xiàn)象。到目前為止，尚未見到定位決定羊毛同質(zhì)性或異質(zhì)性的主效基因。因此，也未見利用基因進行該方向選育的方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種提高細毛羊羊毛同質(zhì)性的分子育種方法，具體來說涉及綿羊GTL2-Mirg一段重復(fù)序列的不同基因型在毛用細毛羊羊毛同質(zhì)性選育中的應(yīng)用，可用于綿羊育種。

本發(fā)明提供了一種鑒定綿羊的GTL2-REs基因型的方法，包括如下步驟：

(1)以供試綿羊的基因組DNA為模板，采用引物F1和引物R1組成的引物對進行PCR擴增；引物F1為序列表的序列1所示的單鏈DNA分子，引物R1為序列表的序列2所示的單鏈DNA分子；

(2)將步驟(1)得到的產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳，如果顯示單一特征帶、該綿羊為GTL2-REs純合基因型，如果顯示兩條特征帶、該綿羊為GTL2-REs雜合基因型。

PCR擴增的反應(yīng)體系中，引物F1的濃度為0.25mM，引物R1的濃度為0.25mM。PCR擴增的反應(yīng)體系具體可為：引物F1?0.5μl，引物R1?0.5μl，2×taq?PCR?Mix?10μl，基因組DNA100ng，雙蒸水補足20μl。

PCR擴增的反應(yīng)程序具體可為：95℃5分鐘；95℃30秒、55℃30秒、72℃30秒，35個循環(huán)；72℃5min；4℃保存。

所述瓊脂糖凝膠電泳具體可為1.5％瓊脂糖凝膠電泳。

所述PCR擴增的產(chǎn)物大小為400-600bp。

所述PCR擴增的目標產(chǎn)物大小為400-600bp。

所述PCR擴增的特異性目標產(chǎn)物大小為400-600bp。

相應(yīng)的，所述特征帶位于400-600bp區(qū)間內(nèi)。

本發(fā)明還提供了一種繁育具有同質(zhì)毛性狀的綿羊的方法，包括如下步驟：