[發明專利]基于水皰性口炎病毒載體的重組新型冠狀病毒及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202011576878.1
• 申請日: 2020-12-28
• 公開（公告）號: CN112941038B
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 鄭愛華;趙超越;李虹悅;張毓航;金萬洙;趙建國
• 申請（專利權）人: 中國科學院動物研究所
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;C12N15/85;C12N15/65;C12N15/50;C12N15/62;A61K39/215;A61P31/14;C12R1/93
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種重組水皰性口炎病毒，為將水皰性口炎病毒的糖蛋白G替換為囊膜蛋白S后得到的病毒；其特征在于：所述重組水皰性口炎病毒為如下1）或2）或3）：

1）將水皰性口炎病毒的糖蛋白G替換為2019-nCoV的囊膜蛋白S后得到的病毒；所述囊膜蛋白S由2019-nCoV的囊膜蛋白S胞外區、囊膜蛋白S跨膜區和囊膜蛋白S胞內區組成；

2）將水皰性口炎病毒的糖蛋白G替換為由2019-nCoV的囊膜蛋白S胞外區和SARS-CoV的囊膜蛋白S跨膜區和胞內區嵌合而成的囊膜蛋白S后得到的病毒；

3）將水皰性口炎病毒的糖蛋白G替換為由2019-nCoV的囊膜蛋白S胞外區和水皰性口炎病毒的糖蛋白G跨膜區和胞內區嵌合而成的囊膜蛋白S后得到的病毒。

2.根據權利要求1所述的重組水皰性口炎病毒，其特征在于：

所述2019-nCoV的囊膜蛋白S的氨基酸序列為序列表中的序列2；

或，所述由2019-nCoV的囊膜蛋白S胞外區和SARS-CoV的囊膜蛋白S跨膜區和胞內區嵌合而成的囊膜蛋白S的氨基酸序列為序列表中的序列4；

或，所述由2019-nCoV的囊膜蛋白S胞外區和水皰性口炎病毒的糖蛋白G跨膜區和胞內區嵌合而成的囊膜蛋白S的氨基酸序列為序列表中的序列6。

3.根據權利要求2所述的重組水皰性口炎病毒，其特征在于：所述1）中，所述重組水皰性口炎病毒為將水皰性口炎病毒基因組序列中的糖蛋白G的編碼基因序列替換為2019-nCoV的囊膜蛋白S的編碼基因序列后得到的病毒；

所述2）中，所述重組水皰性口炎病毒為將水皰性口炎病毒基因組序列中的糖蛋白G的編碼基因序列替換為由2019-nCoV的囊膜蛋白S胞外區和SARS-CoV的囊膜蛋白S跨膜區和胞內區嵌合而成的囊膜蛋白S的編碼基因序列后得到的病毒；

所述3）中，所述重組水皰性口炎病毒為將水皰性口炎病毒基因組序列中的糖蛋白G的編碼基因序列替換為由2019-nCoV的囊膜蛋白S胞外區和水皰性口炎病毒的糖蛋白G跨膜區和胞內區嵌合而成的囊膜蛋白S的編碼基因序列后得到的病毒。

4.一種重組水皰性口炎病毒，是將重組病毒載體轉染病毒包裝細胞，然后進行細胞培養后得到的；所述重組病毒載體為如下A）或B）或C）或D）：

A）將水皰性口炎病毒載體中的水皰性口炎病毒基因組序列中的糖蛋白G的編碼基因序列替換為2019-nCoV的囊膜蛋白S的編碼基因序列后得到的載體；所述囊膜蛋白S由2019-nCoV的囊膜蛋白S胞外區、囊膜蛋白S跨膜區和囊膜蛋白S胞內區組成；

B）將水皰性口炎病毒載體中的水皰性口炎病毒基因組序列中的糖蛋白G的編碼基因序列替換為由2019-nCoV的囊膜蛋白S胞外區和SARS-CoV的囊膜蛋白S跨膜區和胞內區嵌合而成的囊膜蛋白S的編碼基因序列后得到的載體；

C）將水皰性口炎病毒載體中的水皰性口炎病毒基因組序列中的糖蛋白G的編碼基因序列替換為由2019-nCoV的囊膜蛋白S胞外區和水皰性口炎病毒的糖蛋白G跨膜區和胞內區嵌合而成的囊膜蛋白S的編碼基因序列后得到的載體；

D）在A）或B）或C）所述的重組病毒載體中插入報告基因后得到的載體。

5.根據權利要求3或4所述的重組水皰性口炎病毒，其特征在于：所述2019-nCoV的囊膜蛋白S的編碼基因序列為序列表中的序列1；

或，所述由2019-nCoV的囊膜蛋白S胞外區和SARS-CoV的囊膜蛋白S跨膜區和胞內區嵌合而成的囊膜蛋白S的編碼基因序列為序列表中的序列3；

或，所述由2019-nCoV的囊膜蛋白S胞外區和水皰性口炎病毒的糖蛋白G跨膜區和胞內區嵌合而成的囊膜蛋白S的編碼基因序列為序列表中的序列5；

或，所述報告基因為GFP基因。

6.根據權利要求3或4所述的重組水皰性口炎病毒，其特征在于：所述2019-nCoV為2019-nCoV Wuhan-Hu-1毒株；

或，所述SARS-CoV為SARS-CoV BJ01毒株；

或，所述水皰性口炎病毒為水皰性口炎病毒Indiana毒株。