[發明專利]一種昆布多糖的提取方法及應用

在審

• 申請號: 202011575160.0
• 申請日: 2020-12-28
• 公開（公告）號: CN112626150A
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 陳文玉
• 申請（專利權）人: 南京泛成生物科技有限公司
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12P19/04;C08B37/00;A23L33/125
• 代理公司: 南京瑞弘專利商標事務所(普通合伙) 32249
• 代理人: 梁天彥

本發明公開了一種昆布多糖的提取方法及應用，該方法包括將昆布、水和酶混合進行酶解、醇沉、凍干、純化等步驟，得到高純度昆布多糖，并利用該多糖制備了飲片或飲料等產品。本發明的復合酶法反應條件溫和，在最適的反應環境下，酶促反應的高效性和專一性使得多糖的釋放效率得到了較大的提升，因此復合酶法較熱水浸提法、酸浸提法、超聲波輔助提取法等有更高的提取率，提升了多糖的活性和溶解性，具有很好的應用前景。

技術領域

本發明屬于食品科學技術領域，特別涉及一種昆布多糖的提取方法及應用。

背景技術

昆布，其食用部分以海帶科海帶和翅藻科黑昆布的葉狀物為主，是生活中常見的可食用大型海藻，具有軟堅散結、消腫利水、潤下消痰等保健功效。研究發現，昆布的藥理作用與它所含有的多糖成分有關。昆布多糖主要有三種類型：褐藻酸鹽、褐藻淀粉、褐藻糖膠。通過對昆布多糖的深入研究發現其具有多種生理活性。多糖在抗腫瘤方面一直有較為出色的表現，近年來通過實驗發現昆布多糖對于人胃癌NKM-45細胞、卵巢癌SK-OV細胞、宮頸癌HELA細胞、肝癌SMMC-7721細胞，以及小鼠S180肉瘤、B16黑色素瘤細胞等均具有明顯的抑制作用。另外，昆布多糖對特異性免疫和非特異性免疫都有很好的調節作用，能夠提高機體的免疫力。研究還發現，昆布多糖還具有抗病毒、抗凝血、抗炎、抑菌、抗衰老、抗血管生成、調節酪氨酸激酶活性等多種生物活性。

隨著應用開發價值以及市場前景逐漸被重視，昆布多糖的提取分離純化工藝也日漸完善。昆布多糖的提取方法有很多，目前大量研究與應用的主要有熱水浸提法、酸浸提法、酶提法、超聲波輔助提取法等。其中，熱水提法是最廣為人知的方法，因其簡單的提取設備、容易上手的操作、不太高的成本而廣泛用于工業生產。但是，熱水提法提取率沒有其他方法高，耗費時間比較久，且較高的提取溫度容易導致多糖活性被破壞。相較于熱水提法，酸浸提法的提取率有所提高而且耗時也比較短。酸浸提法也有一定的缺點，通過酸浸提法最終得到的多糖分子會有部分降解，且當總糖的濃度增大時，多糖的含量就會有所下降。超聲輔助提取法比酸浸提法得到的多糖含量更高，所含的大分子雜質也略有減少，但是過大的超聲功率可能對多糖分子產生一定的破壞，導致其生理活性降低。如何高效提取多糖的同時保證多糖較高的活性成為人們關注的熱點。

發明內容

發明目的：為了克服現有技術中存在的不足，本發明提供一種昆布多糖的提取方法及應用。

技術方案：為實現上述目的，本發明一種昆布多糖的提取方法，其包括以下步驟，(1)將昆布、水和酶混合，調節pH后混合均勻進行酶解，酶解結束后迅速100℃水浴滅酶10min；(2)減壓抽濾，濾液中加入適量無水乙醇，靜置24h，析出沉淀；(3)將沉淀物用無水乙醇緩慢沖洗2～3次，然后凍干得到多糖制品。

優選的，所述酶包括木瓜蛋白酶、果膠酶、纖維素酶中的一種或幾種。

優選的，按質量分數計，所述木瓜蛋白酶2.5～3.5％、所述果膠酶1.5～2.5％、所述纖維素酶4～6％。

優選的，步驟(1)中，所述調節pH后進行酶解，其為將pH調整為5，在50℃水浴酶解提取3h。

優選的，提取方法中還包括純化，純化步驟包括，(1)溶解多糖制品，采用sevage法去除蛋白質；(2)上DEAE陰離子交換柱，用0.1-0.3mol/LNaCl溶液以1mL/min的流速對樣液進行洗脫，55℃旋轉蒸發濃縮，透析后將透析液進行凍干處理后得到初步純化產品；(3)溶解初步純化產品，上SepHadex G-100葡聚糖凝膠柱，用水以0.5mL/min的流速對樣液進行洗脫，后55℃旋轉蒸發濃縮，最后將透析液真空冷凍干燥，得到純化產品。

作為本發明的另一方面，本發明提供一種昆布多糖，其為黃色、黃白色或白色絮狀固體。

優選的，所述昆布多糖對人乳腺癌細胞MCF-7的半抑制濃度小于512.5μg/mL。

優選的，所述昆布多糖對人肺癌細胞A549的半抑制濃度小于609.7μg/mL。