[發明專利]一種核酸提取磁珠的制備方法及應用

在審

• 申請號: 202011573630.X
• 申請日: 2020-12-25
• 公開（公告）號: CN112588255A
• 公開（公告）日: 2021-04-02
• 發明（設計）人: 陳美玲;張曉蕾
• 申請（專利權）人: 陳美玲
• 主分類號: B01J20/06
• 分類號: B01J20/06;B01J20/28;B01J20/30;C12N15/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種核酸提取磁珠的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一，納米磁性氧化物MnFe₂O₄的制備：在反應瓶中，加入三氯化鐵六水合物、氯化錳四水合物和乙二醇，劇烈攪拌使其溶解，加入三氟乙酸鈉與聚(4-苯乙烯磺酸-共聚-馬來酸)鈉鹽，使其完全溶解形成均勻混合物，在劇烈攪拌的條件下，逐滴緩慢加入氨水，直至產生沉淀，之后超聲30min，將反應瓶放入到高溫反應爐中，升溫到190℃，反應6小時。反應結束后，用磁性較強的磁鐵通過磁分離得到納米磁性氧化物MnFe₂O₄，用去離子水和乙醇超聲清洗三次，得到純凈產物，最后在80℃下干燥8小時，即可得到納米磁性氧化物MnFe₂O₄；

步驟二，核酸提取磁珠的制備：將步驟一所制的納米磁性氧化物MnFe₂O₄分散到無水乙醇中超聲處理15-30分鐘后，加入分散劑，攪拌均勻后加入氨水調節混合液的pH到10，緩慢滴加正硅酸乙酯，控制反應溫度在60-80℃，反應3小時，磁分離后，用三氟乙酸調節pH到中性，并在80℃下超聲30分鐘，得到含三氟乙酸的磁微珠，洗滌干燥后即可得到核酸提取磁珠。

2.根據權利要求1所述的一種核酸提取磁珠的制備方法，其特征在于：步驟一中三氯化鐵六水合物、氯化錳四水合物按摩爾比為2-3：1；三氟乙酸鈉與聚(4-苯乙烯磺酸-共聚-馬來酸)鈉鹽與三氯化鐵六水合物按質量比為2-3：1：0.5；三氯化鐵六水合物的質量與乙二醇的體積與氨水體積比為2g:60-70mL:8-10mL。

3.根據權利要求1所述的一種核酸提取磁珠的制備方法，其特征在于：步驟二中納米磁性氧化物MnFe₂O₄的質量與乙醇的體積比為1g：100-200mL；納米磁性氧化物MnFe₂O₄的質量與正硅酸乙酯的體積比為2g：2.5-5mL。

4.根據權利要求1所述的一種核酸提取磁珠的制備方法，其特征在于：所制備的核酸提取磁珠在生物檢材中核酸提取中的應用。