[發明專利]小黑楊磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C編碼基因PsnPI-PLC及其應用

有效

• 申請號: 202011573064.2
• 申請日: 2020-12-24
• 公開（公告）號: CN112522293B
• 公開（公告）日: 2023-06-27
• 發明（設計）人: 孫堯;王雷;李瑤;黃國慶;吳瓊;曹滌非;薛佳瑩;孫鑫
• 申請（專利權）人: 黑龍江省科學院高技術研究院
• 主分類號: C12N15/55
• 分類號: C12N15/55;C12N9/16;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82;C12Q1/6895
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 岳泉清

小黑楊磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C編碼基因PsnPI?PLC及其應用,它涉及小黑楊磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C編碼基因PsnPI?PLC及其應用。其目的在于提供小黑楊磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C編碼基因PsnPI?PLC及其應用。小黑楊磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C編碼基因PsnPI?PLC核苷酸序列如序列表Seq?ID?No：1所示，氨基酸序列如序列表Seq?ID?No：2所示，該基因應用在提高植物耐鹽性上。PsnPI?PLC過表達煙草植株耐鹽性優于非轉基因植株，該基因過表達可以提升煙草的耐鹽性，在林木耐鹽育種領域有較高的應用價值，本發明應用于分子育種領域。

技術領域

本發明涉及一種基因及其編碼蛋白和應用，尤其涉及小黑楊磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C編碼基因PsnPI-PLC。

背景技術

脂信號是植物信號轉導的重要組成部分，生物體通過脂質濃度的變化促進信號級聯及傳遞，進而調控細胞及個體的生命活動。磷脂酶C(phospholipase?C，PLC)是磷脂酶家族的一員，可以水解磷脂生成包含磷酸基團的頭部和二酰甘油(DAG)，根據其作用底物的不同可以分為非特異性磷脂酶C(non-specific?PLC,NPC)和磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C(phosphatidylinositol-specific?PLC,PI-PLC)。

動植物中絕大多數PLC均為PI-PLC(以下簡稱PLC),它主要由PH?domain(N端)、EF手型domain、X?domain、Y?domain和C2?domain(C端)組成。植物只存在一種亞型的PLC，結構上與PLCδ亞家族接近，它缺失了PH?domain，PH?domain不具有催化活性但可以幫助PLC錨定于質膜上的底物。在PH?domain缺失的情況下，PLC通過X-Y?domain之間的連接序列與PIP2結合。X和Y?domain的氨基酸序列最為保守，這兩個區域由α螺旋和β折疊交替組成，是酶的催化中心；EF手型domain具有1個典型的可與Ca²⁺相結合的螺旋-轉角-螺旋結構，大多數植物PLC只含有2個EF手型domain(動物中為4個)，EF手型domain缺失是否影響金屬離子的結合，迄今為止尚不清楚；在一些植物中，C2?domain調控PLC與磷脂結合，這一過程受Ca²⁺調控，在EF手型domain缺失時仍能完成，該區域對保持催化活性具有輔助作用。

楊樹有極高的經濟價值和生態價值，但絕大多數楊樹品種抗旱、抗鹽堿能力較弱。小黑楊(PopuLus?simoniixP.nigra)，是小葉楊與歐洲黑楊的雜交種，它生長快，適應性強，抗寒，抗旱，耐瘠薄，輕度耐鹽堿，是重要的綠化和造林樹種。但在水資源缺乏、鹽漬化嚴重的地區，楊樹的生長發育會受到影響。為培育楊樹抗逆新品種，大量抗逆基因已被應用于楊樹分子育種研究，獲得高效、穩定的抗逆楊樹植株，需要明確相關基因作用機理和完整上下游信號通路，在此基礎上對育種過程有針對性的進行改良，可為楊樹的耐鹽機制研究奠定基礎，具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種小黑楊磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C編碼基因PsnPI-PLC及其應用。

本發明小黑楊磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C編碼基因PsnPI-PLC的核苷酸序列如序列表Seq?ID?No：1所示。

本發明小黑楊磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C編碼基因PsnPI-PLC應用在提高植物耐鹽性上。

本發明小黑楊磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C編碼基因PsnPI-PLC應用于選育耐鹽性轉基因植物。

本發明的有益效果是：