[發(fā)明專(zhuān)利]小鼠腸卷標(biāo)本制備裝置及方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011571509.3
• 申請(qǐng)日: 2020-12-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112586491A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-04-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊藝;肖繼
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 李琳超
• 主分類(lèi)號(hào): A01N1/00
• 分類(lèi)號(hào): A01N1/00
• 代理公司: 衡陽(yáng)市科航專(zhuān)利事務(wù)所 43101
• 代理人: 劉政旺

1.小鼠腸卷標(biāo)本制備裝置，其特征是：包括卷繞器和蠟條；卷繞器包括手柄和固定連接在手柄一端的卡座，卡座遠(yuǎn)離手柄的端部設(shè)有插孔；蠟條一端插裝在卡座的插孔中，另一端從卡座的插孔中伸出。

2.如權(quán)利要求1所述的小鼠腸卷標(biāo)本制備裝置，其特征是：卡座的插孔為正六棱柱形孔，插孔的孔口處設(shè)有倒角，相應(yīng)的，蠟條呈正六棱柱形，并與插孔的尺寸相適應(yīng)。

3.如權(quán)利要求2所述的小鼠腸卷標(biāo)本制備裝置，其特征是：蠟條的橫切面的最大內(nèi)接圓的直徑為10mm，卡座的插孔的深度為20mm。

4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的小鼠腸卷標(biāo)本制備裝置，其特征是：手柄為正四棱柱形桿，蠟條的軸心線與手柄的軸心線重合。

5.如權(quán)利要求4所述的小鼠腸卷標(biāo)本制備裝置，其特征是：定心回轉(zhuǎn)機(jī)構(gòu)包括插套、軸承、軸承座和端蓋；軸承座內(nèi)部設(shè)有用于安裝軸承的內(nèi)腔，內(nèi)腔中設(shè)有環(huán)形臺(tái)階面；插套呈圓柱形，其中心處設(shè)有貫通其兩側(cè)端面的通孔A，通孔A與手柄的外形尺寸相適應(yīng)；軸承套裝在插套上，并安裝在軸承座的內(nèi)腔中，其一端通過(guò)軸承座內(nèi)腔中的環(huán)形臺(tái)階面定位，其另一端通過(guò)端蓋定位；端蓋設(shè)在軸承座的一端，并與軸承座和插套固定連接，其中心處設(shè)有可供手柄通過(guò)的通孔B；定心回轉(zhuǎn)裝置通過(guò)插套上的通孔A與卷繞器的手柄插接。

6.小鼠腸卷標(biāo)本制備方法，應(yīng)用于權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的小鼠腸卷標(biāo)本制備裝置，其特征是，步驟如下：

S01，取樣小鼠小腸：

a、將小鼠麻醉后固定于操作臺(tái)，暴露胸壁，心臟穿刺放血，至小鼠失血性休克；

b、待小鼠死亡后，腹部消毒，剪開(kāi)腹壁，暴露腹腔，游離并切斷小腸上段的賁門(mén)部，結(jié)扎小腸上段開(kāi)口，再游離并切斷小腸下段的回盲部；

c、通過(guò)注射器向小腸內(nèi)注射生理鹽水，以沖洗小腸內(nèi)腔，使小腸內(nèi)腔中的內(nèi)容物從腸道下段切口處排出；

d、結(jié)扎小腸下段開(kāi)口，游離出全段小腸，使用注射器向游離出的小腸內(nèi)注入2ml生理鹽水，以避免小腸內(nèi)腔塌陷而導(dǎo)致腔壁粘連；

S02，制作矩形腸皮：

將注入生理鹽水的小腸放置于玻璃皿中，在小腸上段緊鄰結(jié)扎口的位置剪開(kāi)一個(gè)橫向切口，再將剪刀刀刃從橫向切口處伸入小腸內(nèi)腔，沿小腸的縱向方向從上至下剪開(kāi)小腸，將橫向切口上段的小腸切除，并剪開(kāi)小腸下段的接扎線，最終形成一條矩形腸皮；

S03，矩形腸皮硬化處理：

將矩形腸皮的絨毛面朝上，展開(kāi)平鋪于操作臺(tái)面上，再將Bouins液撒在矩形腸皮上，對(duì)矩形腸皮進(jìn)行5-10min的硬化處理，以固定矩形腸皮的形態(tài)，便于后續(xù)的腸卷制作；

S04，制作腸卷：

a、用鑷子鉗取矩形腸皮的一端放置在蠟條上，并保證矩形腸皮的絨毛面朝向蠟條表面，然后轉(zhuǎn)動(dòng)手柄，通過(guò)手柄帶動(dòng)蠟條轉(zhuǎn)動(dòng)，從而將矩形腸皮以蠟條為軸心，逐圈環(huán)繞蠟條形成圓柱形腸卷；

b、斷開(kāi)蠟條與卡座的連接后，將蠟條和腸卷一同置于Bouins液中浸泡，對(duì)腸卷進(jìn)行硬化處理，以固定腸卷的形態(tài)，防止后續(xù)浸泡福爾馬林溶液時(shí)腸卷散開(kāi)或變形；

c、再將蠟條和腸卷從Bouins液中取出，轉(zhuǎn)移到福爾馬林溶液中浸泡6-10h，對(duì)小腸進(jìn)行組織進(jìn)一步固定，以終止內(nèi)源性或外源性酶反應(yīng)，防止組織自溶或異溶，保持組織原有的形態(tài)，避免抗原失活或彌散；

d、用鋒利的刀刃沿腸卷的徑向面下刀，切除腸卷軸向兩端的組織和超出腸卷軸向兩端的蠟條部分，僅保留腸卷軸向2-3cm的寬度，最終得到符合包埋盒尺寸的圓柱形腸卷，將圓柱形腸卷置于包埋盒中；

S05，腸卷脫水：

a、將包埋盒置于流動(dòng)水中沖洗10min，充分除去圓柱形腸卷上的福爾馬林溶液；

b、將包埋盒置于裝有75%酒精的脫水盒A中浸泡80min；

c、將包埋盒從脫水盒A中取出，置于裝有85%酒精的脫水盒B中浸泡80min；

d、將包埋盒從脫水盒B中取出，置于裝有95%酒精的脫水盒C中浸泡80min；

e、將包埋盒從脫水盒C中取出，置于裝有純酒精的脫水盒D中浸泡80min；

f、將包埋盒從脫水盒D中取出，置于裝有純酒精的脫水盒E中浸泡80min；

S06，腸卷浸蠟：

a、將包埋盒從脫水盒E中取出，置于裝有二甲苯原液的溶液盒A中浸泡20min；

b、將包埋盒從浸蠟盒A中取出，置于裝有二甲苯原液的溶液盒B中浸泡30min；

c、將裝有軟蠟的浸蠟盒A置于烘箱中烘烤，使軟蠟融化，再將包埋盒從溶液盒B中取出，置于浸蠟盒A中浸泡液態(tài)軟蠟60min；

d、將裝有軟蠟的浸蠟盒B置于烘箱中烘烤使其軟化呈液態(tài)，再將包埋盒從浸蠟盒A中取出，置于浸蠟盒B中浸泡液態(tài)軟蠟60min；

e、將裝有硬蠟的浸蠟盒C置于烘箱中烘烤使其軟化呈液態(tài)，再將包埋盒從浸蠟盒B中取出，置于浸蠟盒C中浸泡液態(tài)硬蠟120min；

S07，腸卷包埋：

a、將脫水浸蠟后的圓柱形腸卷取出，置于包埋模具凹槽底部中心位置；

b、將液態(tài)硬蠟注滿整個(gè)包埋模具凹槽，蓋上包埋模具的蓋子；

c、將整個(gè)包埋模具置于-18～-22℃的冷藏柜中靜置20分鐘；

d、將包埋模具的蓋子取下，再將包埋模具倒置，輕叩包埋模具，使包含腸卷的蠟塊從包埋模具中完整的脫出。