[發明專利]一種他克莫司發酵液固液分離方法

在審

• 申請號: 202011563881.X
• 申請日: 2020-12-25
• 公開（公告）號: CN112694486A
• 公開（公告）日: 2021-04-23
• 發明（設計）人: 劉永勝;胡寧;劉小艷;李艷琴
• 申請（專利權）人: 蘇州營力醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D498/18
• 分類號: C07D498/18;B01D15/00
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

本發明屬于提純技術領域，涉及一種他克莫司發酵液固液分離方法，步驟包括：(1)樹脂吸附，(2)離心分離，(3)樹脂洗脫。本方法先利用密度差異將菌絲體與大孔吸附樹脂離心分離，節省了浸提需要的溶劑，浸提液質量高，色素少，不僅更加經濟，而且降低了環保壓力。

技術領域

本發明涉及提純技術領域，特別涉及一種他克莫司發酵液固液分離方法。

背景技術

他克莫司(tacrolimus,FK506)是由日本藤澤藥品工業公司在1984年自日本筑波山土壤中分離的筑波鏈霉菌(streptomyces tsukubaensis)No.9993的發酵液中提取得到的一種新型二十三元大環內酯聚酮免疫抑制劑。臨床研究表明，其免疫抑制活性是傳統免疫劑環孢素A的10～100倍。目前已廣泛應用于肝臟、骨髓移植，對其它藥物耐藥腎移植的排斥防治，白塞氏病、變性性皮炎、銀屑病、魚鱗病、斑禿、類風濕性關節炎、牛皮蘚，多發性硬化病、糖尿病等多種自身免疫疾病的治療。自在中國上市的短短時間內，市場份額迅速上升，已成為肝臟及腎移植后排斥反應的臨床一線藥物。

他克莫司是由發酵產生的，所以在發酵液存在很多副產物，需要進一步提純來分離他克莫司。發酵液中存在的成分需要先進行固液分離，以往的工藝步驟是：

步驟(1)：發酵培養48小時時向發酵液中補入發酵液體積3％的大孔吸附樹脂，在培養過程中菌絲體次級代謝產生的他克莫司被大孔吸附樹脂吸附，發酵放罐單位比不加樹脂提高20％以上。

步驟(2)：發酵結束后用板框壓濾機對發酵液固液分離，同時收集到菌絲體和吸附樹脂，經HPLC檢測后發現菌絲體內的他克莫司的含量為0，所有發酵過程中產生的他克莫司均被樹脂吸附。

步驟(3)：用5倍量的甲醇溶液對菌絲體和吸附樹脂浸提。

這個工藝的缺點在于用板框壓濾機壓濾他克莫司發酵液會同時收集到菌絲體和大孔吸附樹脂，因兩者無法有效的分離，所以雖然菌絲體內是不含他克莫司的，浸提時仍然需要對菌絲體和大孔吸附樹脂同時浸提，所以浸提過程溶劑消耗量大，浸提出的雜質也更多，大量的溶劑后處理也對環境產生了很大的壓力。

因此有必要開發一種新的提純工藝來解決以上問題。

發明內容

本發明的主要目的在于提供一種他克莫司發酵液固液分離方法，能夠減少浸提所需溶劑，提升浸提液質量，減少環保壓力。

本發明通過如下技術方案實現上述目的：一種他克莫司發酵液固液分離方法，步驟包括：

(1)樹脂吸附：在發酵液中補入發酵液體積3％的大孔吸附樹脂攪拌至完全吸附；

(2)離心分離：通過高速管式離心機對發酵液進行固液分離，讓吸附了他克莫司的大孔吸附樹脂處于離心管的下部，取出大孔吸附樹脂；

(3)樹脂洗脫：將大孔吸附樹脂先用第一洗脫劑洗脫色素，然后再用第二洗脫劑洗脫他克莫司，得到他克莫司浸提液。

具體的，所述步驟(3)中的第一洗脫劑為50％體積含量的甲醇溶液。

進一步的，所述第一洗脫劑的用量為5倍樹脂體積。

具體的，所述步驟(3)中的第二洗脫劑為75％體積含量的甲醇溶液。

進一步的，所述第二洗脫劑的用量為5倍樹脂體積。

采用上述技術方案，本發明技術方案的有益效果是：

本方法先利用密度差異將菌絲體與大孔吸附樹脂離心分離，節省了浸提需要的溶劑，浸提液質量高，色素少，不僅更加經濟，而且降低了環保壓力。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明作進一步詳細說明。

實施例：