[發明專利]一種基于低共熔溶劑的糖基化蛋白制備方法在審
| 申請號： | 202011561577.1 | 申請日： | 2020-12-25 |
| 公開（公告）號： | CN112679752A | 公開（公告）日： | 2021-04-20 |
| 發明（設計）人： | 宋亮;趙珂瑤;付晶晶;徐獻兵;孫叢;白長軍;姜鵬飛 | 申請（專利權）人： | 大連工業大學 |
| 主分類號： | C08H1/00 | 分類號： | C08H1/00 |
| 代理公司： | 大連格智知識產權代理有限公司 21238 | 代理人： | 劉琦 |
| 地址： | 116034 遼*** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 基于 低共熔 溶劑 糖基化 蛋白 制備 方法 | ||
1.一種基于低共熔溶劑的糖基化蛋白制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
S1、低共熔溶劑制備：將摩爾質量比為1:1-1.5:1的氯化膽堿與葡萄糖以150-250rpm的轉速混合攪拌，于85-100℃油浴4-6小時，得到均勻透明的DES；
S2、糖基化蛋白制備：將S1制得的所述DES用0.01M且pH＝6.9-7.2的PBS按5:2-2:1m/m的比例稀釋，并充分混合；再將稀釋后的DES溶液與BSA，以20:1-25:1m/m混合，于90-100℃油浴1.5-2.5小時，得到GBSA。
2.根據權利要求1所述基于低共熔溶劑的糖基化蛋白制備方法，其特征在于，GBSA的純化方法為：將步驟S2中制得的所述GBSA溶液用0.01M且pH＝6.9-7.2的PBS稀釋至100-150mL，將GBSA在室溫條件下透析至澄清，再冷凍干燥得到純化的GBSA。
3.根據權利要求2所述基于低共熔溶劑的糖基化蛋白制備方法，其特征在于，步驟S3中所述透析使用3-8kDa的透析袋，透析時間20-30小時。
4.一種基于低共熔溶劑的糖基化蛋白，其特征在于組分包括：氯化膽堿、葡萄糖、PBS、BSA，其中氯化膽堿、葡萄糖、PBS混合物與BSA的比例為20:1-25:1m/m。
5.根據權利要求4所述的基于低共熔溶劑制備的糖基化蛋白，其特征在于，所述氯化膽堿與所述葡萄糖的摩爾質量比為1:1-1.5:1。
6.根據權利要求4所述的基于低共熔溶劑制備的糖基化蛋白，其特征在于，氯化膽堿、葡萄糖混合物與PBS的比例為5:2-2:1m/m。
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