[發明專利]一種多年生木本植物氮效率田間有效測定方法

在審

• 申請號: 202011561118.3
• 申請日: 2020-12-25
• 公開（公告）號: CN112730346A
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發明（設計）人: 阮麗;王麗鴛;師大亮;成浩;韋康;吳立赟;何夢迪
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院茶葉研究所;杭州市農業科學研究院
• 主分類號: G01N21/63
• 分類號: G01N21/63;G01N27/64
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所(普通合伙) 33213
• 代理人: 沈淵琪

1.一種多年生木本植物氮效率田間有效測定方法，其特征在于包括以下步驟：

1）空白對照樣品采集：對多年生木本植物進行頂端成熟葉片收集，分別設置3個生物學重復，每個生物學重復3-5株植物，每株植物選取10片頂端成熟葉片；

2）處理設置：設置0.05、0.2、0.5、2、5mM5個氮濃度梯度，采用50%豐度的¹⁵N同位素標記的尿素；

3）¹⁵N同位素標記過程：每株植物分別用500mL上述5個氮濃度梯度的50%豐度¹⁵N同位素標記的尿素沿基部一圈緩慢澆灌；

4）樣品采集：一周后采集每株植物頂端成熟葉片，每株植物采集10片；

5）樣品制備：對步驟2）采集的空白對照樣品葉片和步驟4）采集的樣品葉片分別用純水洗干凈，冷凍干燥后，用粉碎機磨碎，放置于干燥皿中保存，待測；

6）樣品檢測：采用C/N元素分析儀經連續流接口裝置與同位素質譜分析儀連接測定步驟5）所述樣品50%豐度的¹⁵N豐度和全氮含量，用IAEA-N-1標準物質對實驗室鋼瓶N₂進行標定，氮同位素以大氣氮為參考標準；

7）根據步驟6）的測定數據，計算植物的氮效率，

公式如下：NE=[(TN%·Atom%)_Treatment-(TN%·Atom%)_Blank]·100/15，

其中：NE為氮效率，TN%為植株全氮含量，Atom%為¹⁵N原子百分比，(TN%·Atom%)_Treatment為不同¹⁵N濃度處理的植株¹⁵N含量，(TN%·Atom%)_Blank為未加¹⁵N標記前空白對照的植株¹⁵N含量；

8）采用Origin或SigmaPlot對植物氮效率關系式進行非線性擬合，得到擬合公式：

NE=NE_a·C/（A＋C），NE_b= NE_a/A，

其中：NE為氮效率，NE_a為高氮條件下的氮效率潛力，C為氮濃度，A為常數，NE_b為低氮條件下的氮效率潛力。

2.如權利要求1所述的一種多年生木本植物氮效率田間有效測定方法，其特征在于所述步驟1）中多年生木本植物為田間成林后的木本植物。

3.如權利要求1或2所述的一種多年生木本植物氮效率田間有效測定方法，其特征在于所述多年生木本植物為茶樹品種。

4.如權利要求1所述的一種多年生木本植物氮效率田間有效測定方法，其特征在于選取氮高效品種作為對照品種進行所述步驟1）-8）氮效率測定，測定結果與樣品植物的氮效率對比，評價樣品植物的氮效率水平。

5.如權利要求4所述的一種多年生木本植物氮效率田間有效測定方法，其特征在于所述氮高效品種植物為福鼎大白、龍井3。