[發明專利]基于SERS傳感基底的多種腫瘤標志物的非診斷性檢測方法有效
| 申請號： | 202011553653.4 | 申請日： | 2020-12-24 |
| 公開（公告）號： | CN112730836B | 公開（公告）日： | 2023-05-05 |
| 發明（設計）人： | 程琳;朱桂賢;劉淦楠;許佳琦 | 申請（專利權）人： | 北京信息科技大學 |
| 主分類號： | G01N33/574 | 分類號： | G01N33/574;G01N33/543;G01N21/65 |
| 代理公司： | 北京遠創理想知識產權代理事務所(普通合伙) 11513 | 代理人： | 衛安樂 |
| 地址： | 100192 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 sers 傳感 基底 多種 腫瘤 標志 診斷 檢測 方法 | ||
1.一種基于SERS傳感基底的多種腫瘤標志物的非診斷性檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)將檸檬酸三鈉溶液加入至85～95℃的氯化金酸溶液中，保溫反應20～30min，降溫，離心，得到上清液和納米金體系；其中，該上清液與納米金體系的體積比為9～9.3:1；
(2)將所述納米金體系與含拉曼標簽分子的溶液在攪拌下混合反應，靜置，得到納米金-標簽分子體系；
(3)將蛋白點樣液與待測的腫瘤標志物以1:8.9～9.1的體積比混合，并以均勻陣列點樣，靜置，得到抗原陣列芯片；形成均勻陣列所用基底設備為具有均勻格欄的石英片；
(4)將與所述腫瘤標志物對應的抗體加入至步驟(2)得到的納米金-標簽分子體系中混合反應1.5～2.5h，加入10wt％的BSA硼酸緩沖液反應，離心并將上清液去除，下層物質即為納米金-標簽分子-抗體體系；將該體系儲存于含0.1wt％BSA的硼酸緩沖液中；
(5)將步驟(3)得到的抗原陣列芯片置于含1wt％的BSA的磷酸緩沖鹽溶液中1h，用磷酸鹽吐溫緩沖液沖洗抗原陣列芯片，將抗原陣列芯片置于搖床上搖動；
(6)將步驟(4)得到的納米金-標簽分子-抗體體系滴入所述抗原陣列芯片的陣列中反應25～30min，用磷酸鹽吐溫緩沖液清洗；
(7)將步驟(6)所得的樣本用顯微共焦拉曼光譜儀掃描成像。
2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，步驟(1)中，氯化金酸溶液的濃度為0.008～0.012wt％，檸檬酸三鈉溶液的濃度為0.9～1.2wt％。
3.根據權利要求2所述的檢測方法，其特征在于，步驟(1)中，所述檸檬酸三鈉溶液與氯化金酸溶液的體積比為1:98～102。
4.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，步驟(1)中，所述納米金體系的粒徑為40～60nm。
5.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，步驟(2)中，納米金體系與含拉曼標簽分子的溶液的體積比為95～105:1。
6.根據權利要求5所述的檢測方法，其特征在于，所述拉曼標簽分子選自4-氨基苯硫酚、二硫代雙(2-硝基苯甲酸)和4-巰基苯甲酸中的一種。
7.根據權利要求1～6任一項所述的檢測方法，其特征在于，步驟(4)中，所述10wt％的BSA硼酸緩沖液與納米金體系的體積比為0.07～0.15:1。
8.根據權利要求7所述的檢測方法，其特征在于，步驟(4)中，所述0.1wt％的BSA硼酸緩沖液的pH值為7.3～7.5。
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