[發(fā)明專利]一種固體芽孢桿菌微生物菌劑及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011553312.7
• 申請(qǐng)日: 2020-12-24
• 公開（公告）號(hào): CN112980718B
• 公開（公告）日: 2023-07-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張琪;盤文政;李勇杰;趙崇鈞;唐建波;華小兵;楊潤(rùn)霞;毛明林;王斌;徐思琪;肖勇飛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南省微生物發(fā)酵工程研究中心有限公司;云南云葉化肥股份有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12N11/14;C12N11/10;C05F11/08;C05F17/20;C12R1/07
• 代理公司: 昆明鴻昊知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 53211
• 代理人: 陳芃綦

1.一種固體芽孢桿菌微生物菌劑，其特征在于，所述固體芽孢桿菌微生物菌劑是通過將芽孢桿菌菌種進(jìn)行多級(jí)培養(yǎng)后得到的發(fā)酵液進(jìn)行濃縮離心，再將濃縮離心后得到的菌種濃縮液進(jìn)行噴霧干燥制得的芽孢桿菌微生物菌粉，并且所述微生物菌劑中的芽孢桿菌有效活菌數(shù)不小于1×10¹¹CFU/g；其中，

所述芽孢桿菌菌種的多級(jí)培養(yǎng)包括如下過程：

將芽孢桿菌菌種接種到液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)制得接種液；將接種液在滅菌液體培養(yǎng)基A的環(huán)境下進(jìn)行一次發(fā)酵得到發(fā)酵液A；將發(fā)酵液A在滅菌液體培養(yǎng)基B的環(huán)境下進(jìn)行二次發(fā)酵得到發(fā)酵液B；

將濃縮離心后得到的菌種濃縮液進(jìn)行噴霧干燥包括如下過程：

將菌種濃縮液加入攪拌罐中，加入10％～13％的輔料，通過0.9Pa的壓力將所述菌種濃縮液壓至旋轉(zhuǎn)噴頭，并使噴頭保持在轉(zhuǎn)速為20000r/min下噴霧，同時(shí)在干燥塔中通入150℃、4000m³/h的熱風(fēng)進(jìn)行干燥，經(jīng)過噴霧干燥后制得芽孢桿菌有效活菌數(shù)不小于1×10¹¹CFU/g的芽孢桿菌微生物菌粉；

所述輔料包括如下重量份的組分：硅藻土55～65份，碳酸鈣15～25份，淀粉15～25份；

所述芽孢桿菌為解淀粉芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和/或地衣芽孢桿菌；其中，

解淀粉芽孢桿菌，其編號(hào)為WSWFJ45，保藏登記號(hào)為CGMCC?No.20148；

枯草芽孢桿菌，其編號(hào)為WSWFJ34，保藏登記號(hào)為CGMCC?No.20141；

地衣芽孢桿菌，其編號(hào)為WSWFJ47，保藏登記號(hào)為CGMCC?No.20149。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固體芽孢桿菌微生物菌劑，其特征在于，將芽孢桿菌菌種接種到液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)制得接種液包括如下過程：

將準(zhǔn)備好的芽孢桿菌菌種，按照3‰～5‰的比例接種到液體LB培養(yǎng)基中，在35℃～38℃條件下振蕩培養(yǎng)24h后得到接種液，并使接種液中的芽孢桿菌有效活菌數(shù)不小于1×10⁸CFU/mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固體芽孢桿菌微生物菌劑，其特征在于，將接種液在滅菌液體培養(yǎng)基A的環(huán)境下進(jìn)行一次發(fā)酵得到發(fā)酵液A包括如下過程：

將制備的接種液接種到發(fā)酵罐中，加入占發(fā)酵罐體積60％～70％的滅菌液體培養(yǎng)基A，保持罐內(nèi)溫度37℃，供氧氣量15m³/h，發(fā)酵17h～20h后得到發(fā)酵液A，并使發(fā)酵液A中的芽孢桿菌有效活菌數(shù)不小于1×10⁸CFU/mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固體芽孢桿菌微生物菌劑，其特征在于，將發(fā)酵液A在滅菌液體培養(yǎng)基B的環(huán)境下進(jìn)行二次發(fā)酵得到發(fā)酵液B包括如下過程：

將發(fā)酵液A導(dǎo)入發(fā)酵罐中，加入占發(fā)酵罐體積60％～70％的滅菌液體培養(yǎng)基B，保持罐內(nèi)溫度37℃，供氧氣量15m³/h，發(fā)酵23～25h后得到發(fā)酵液B，并使發(fā)酵液B中的芽孢桿菌有效活菌數(shù)不小于1×10⁹CFU/mL。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的固體芽孢桿菌微生物菌劑，其特征在于，所述液體培養(yǎng)基A包括如下重量份的組分：黃豆粉5g/L，玉米粉5g/L，蔗糖12g/L，蛋白胨10g/L，魚粉7g/L，碳酸鈣4g/L，磷酸二氫鉀0.8g/L，硫酸錳1g/L，硫酸銨1.2g/L；

所述液體培養(yǎng)基B包括如下重量份的組分：黃豆粉14g/L，玉米粉4g/L，蔗糖3g/L，蛋白胨2g/L，魚粉2g/L，碳酸鈣6g/L，磷酸二氫鉀0.3g/L，硫酸鎂0.3g/L，硫酸錳0.2g/L，磷酸氫二鉀0.3g/L，氯化鈉0.3g/L，硫酸銨0.5g/L，氫氧化鈉0.25g/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固體芽孢桿菌微生物菌劑，其特征在于，將芽孢桿菌菌種進(jìn)行多級(jí)培養(yǎng)后得到的發(fā)酵液進(jìn)行濃縮離心包括如下過程：

將芽孢桿菌菌種進(jìn)行多級(jí)培養(yǎng)后得到的發(fā)酵液導(dǎo)入碟式離心機(jī)中，在轉(zhuǎn)速6000r/min下離心15min，離心后排除上層菌懸液，得到菌種濃縮液，并使菌種濃縮液中的芽孢桿菌有效活菌數(shù)不小于1×10¹⁰CFU/mL。

7.一種權(quán)利要求1至6之一所述的固體芽孢桿菌微生物菌劑的應(yīng)用，其特征在于，所述固體芽孢桿菌微生物菌劑通過蘸根、灌根、澆施和葉面噴施中的一種或多種方法向作物施用；或者是所述固體芽孢桿菌微生物菌劑與肥料進(jìn)行配伍制成生物肥料作為底肥施用；或者是所述固體芽孢桿菌微生物菌劑作為發(fā)酵菌種用于有機(jī)廢棄物發(fā)酵腐熟。