[發明專利]一種固體芽孢桿菌微生物菌劑及其制備方法

有效

• 申請號: 202011553266.0
• 申請日: 2020-12-24
• 公開（公告）號: CN112980717B
• 公開（公告）日: 2023-07-07
• 發明（設計）人: 趙崇鈞;張琪;李勇杰;盤文政;唐建波;華小兵;楊潤霞;毛明林;王斌;徐思琪;肖勇飛
• 申請（專利權）人: 云南省微生物發酵工程研究中心有限公司;云南云葉化肥股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N11/14;C12N11/10;C05F11/08;C05F17/20;C12R1/125;C12R1/10;C12R1/07
• 代理公司: 昆明鴻昊知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 53211
• 代理人: 陳芃綦

本發明公開了一種固體芽孢桿菌微生物菌劑及其制備方法，涉及肥料技術領域，解決了現有技術中的固體芽孢桿菌微生物菌劑中有效活菌數不高的技術問題。本發明固體芽孢桿菌微生物菌劑的制備方法包括如下步驟：將芽孢桿菌菌種接種到液體培養基中培養制得接種液；將接種液在滅菌液體培養基A的環境下進行一次發酵得到發酵液A；將發酵液A在滅菌液體培養基B的環境下進行二次發酵得到發酵液B；將發酵液B進行濃縮離心制得菌種濃縮液；將菌種濃縮液進行噴霧干燥制得芽孢桿菌菌粉，并且芽孢桿菌菌粉中的芽孢桿菌有效活菌數不小于1×10¹¹CFU/g。本發明制得的固體芽孢桿菌微生物菌劑中的芽孢桿菌有效活菌數不小于1×10¹¹CFU/g，相比于現有技術中的產品明顯提高。

技術領域

本發明涉及肥料技術領域，尤其涉及一種固體芽孢桿菌微生物菌劑及其制備方法。

背景技術

隨著農業的迅速發展，微生物功能菌劑在農業生產中的應用越來越廣泛，其具有促進作物生長、防治作物上的病蟲害、提高作物抗逆性、改良作物種植土壤環境、發酵腐熟有機物料等作用。在微生物菌劑使用過程中，有效菌含量是微生物菌劑的主要指標。然而，申請人發現，采用現有工藝制得的固體芽孢桿菌微生物菌劑存在微生物菌劑中有效活菌數不高的問題。

因此，對固體芽孢桿菌微生物菌劑的制備工藝進行改良，以提升物生物菌劑中的有效活菌數成為本領域技術人員亟待解決的技術問題。

發明內容

本發明的其中一個目的是提出一種固體芽孢桿菌微生物菌劑及其制備方法，解決了現有技術中的固體芽孢桿菌微生物菌劑中有效活菌數不高的技術問題。本發明優選技術方案所能產生的諸多技術效果詳見下文闡述。

為實現上述目的，本發明提供了以下技術方案：

本發明的固體芽孢桿菌微生物菌劑的制備方法，所述方法包括如下步驟：

將芽孢桿菌菌種接種到液體培養基中培養制得接種液；

將接種液在滅菌液體培養基A的環境下進行一次發酵得到發酵液A；

將發酵液A在滅菌液體培養基B的環境下進行二次發酵得到發酵液B；

將發酵液B進行濃縮離心制得菌種濃縮液；

將菌種濃縮液進行噴霧干燥制得芽孢桿菌菌粉，并且所述芽孢桿菌菌粉中的芽孢桿菌有效活菌數不小于1×10¹¹CFU/g。

根據一個優選實施方式，所述芽孢桿菌為解淀粉芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和/或地衣芽孢桿菌；其中，解淀粉芽孢桿菌，其編號為WSWFJ45，保藏登記號為CGMCC?No.20148；枯草芽孢桿菌，其編號為WSWFJ34，保藏登記號為CGMCC?No.20141；地衣芽孢桿菌，其編號為WSWFJ47，保藏登記號為CGMCC?No.20149。

根據一個優選實施方式，將芽孢桿菌菌種接種到液體培養基中培養制得接種液包括如下過程：將準備好的芽孢桿菌菌種，按照3‰～5‰的比例接種到液體LB培養基中，在35℃～38℃條件下振蕩培養24h后得到接種液，并使接種液中的芽孢桿菌有效活菌數不小于1×10⁸CFU/mL。

根據一個優選實施方式，將接種液在滅菌液體培養基A的環境下進行一次發酵得到發酵液A包括如下過程：將制備的接種液接種到發酵罐中，加入占發酵罐體積60％～70％的滅菌液體培養基A，保持罐內溫度37℃，供氧氣量15m³/h，發酵17h～20h后得到發酵液A，并使發酵液A中的芽孢桿菌有效活菌數不小于1×10⁸CFU/mL。

根據一個優選實施方式，所述液體培養基A包括如下重量份的組分：黃豆粉5g/L，玉米粉5g/L，蔗糖12g/L，蛋白胨10g/L，魚粉7g/L，碳酸鈣4g/L，磷酸二氫鉀0.8g/L，硫酸錳1g/L，硫酸銨1.2g/L。