[發明專利]一種牛奶過敏原特異性IgE檢測試劑盒

有效

• 申請號: 202011548729.4
• 申請日: 2020-12-23
• 公開（公告）號: CN112748248B
• 公開（公告）日: 2022-06-14
• 發明（設計）人: 韓晶;朱宇皇;趙冬紅;李忠信;劉功成
• 申請（專利權）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543;G01N33/535;G01N33/532
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 潘穎

本發明涉及檢測試劑技術領域，特別涉及一種牛奶過敏原特異性IgE檢測試劑盒。該試劑盒包括：鏈霉親和素包被的磁微粒、生物素標記的牛奶過敏原、辣根過氧化物酶標記的抗人IgE抗體、校準品、生物素標記的抗人IgE抗體；其中，生物素標記的牛奶過敏原包括生物素標記α?乳白蛋白、生物素標記β?乳球蛋白、生物素標記α?酪蛋白、生物素標記β?酪蛋白、生物素標記κ?酪蛋白及生物素標記牛血清白蛋白。本發明對牛奶過敏蛋白進行分別標記，并按特定比例進行標記，混合配制牛奶過敏蛋白制備抗原溶液的方法，可以提高檢測靈敏度，防止單類抗體檢測漏診的問題；與膠體金、免疫印跡法等手工實驗相比，具有反應時間短、操作簡便、通量大的優點。

技術領域

本發明涉及檢測試劑技術領域，特別涉及一種牛奶過敏原特異性IgE檢測試劑盒。

背景技術

牛奶是很多國家的重要營養來源，是嬰幼兒最常見的食物。牛奶被認為是全球引起嬰幼兒過敏的常見食物，各地發病率從1％到7.5％不等。在中國，部分地區的牛奶過敏也很嚴重。在對中國的食物過敏兒童的研究中發現，牛奶過敏在自我報告型過敏原中排名第三，患病率約10.8％。大多數牛奶過敏的患者在3歲-5歲會產生耐受，不再受到牛奶過敏的困擾，然而仍有15％-20％的患者對牛奶過敏會持續更久。

牛奶過敏癥狀因患者而異，通常包括胃腸道癥狀，如惡心和腹瀉，皮膚病癥狀，哮喘，鼻炎和全身過敏反應。引起食物過敏的免疫機制主要有三個方面：1.IgE介導，以急性發作為特點，可累及一個或多個器官。皮膚以蕁麻疹和血管神經性水腫為主要表現；呼吸系統以鼻結膜炎和哮喘為主要表現；胃腸道以惡心、嘔吐和腹瀉為主要特征；2.非IgE或細胞介導，以遲發或慢性發作為特點，常見臨床表現為小腸結腸炎和直腸炎；3.IgE和非IgE混合介導，臨床表現為延遲或慢性發作，以特異性皮炎或一種嗜酸性胃腸病為表現。據研究牛奶過敏中有54％的患者過敏反應是由IgE介導，有46％的患者過敏反應是由非IgE介導。目前，臨床較為普及的診斷方法主要是皮膚點刺試驗(SPT)和血清總IgE、牛奶特異性IgE檢測。

免疫球蛋白E抗體(IgE)是變態反應疾病的重要介質，介導I型速發型過敏反應。IgE具有親細胞性，其Fc段與肥大細胞或嗜酸性粒細胞表面受體結合，致使肥大細胞或嗜堿性粒細胞致敏，處于致敏狀態的細胞，如牛奶過敏原再次進入機體，位于細胞表面的IgE抗體結合牛奶致敏蛋白的抗原表位，形成“抗原橋”結果，致使細胞膜發生復雜的級聯反應，致敏細胞脫殼粒釋放生物活性介質，活性介質作用于靶組織或器官導致臨床癥狀。

目前牛奶過敏原檢測的試劑盒，主要有免疫印跡、膠體金、酶聯免疫分析法、磁微粒化學發光法和熒光免疫分析法。牛奶特異性檢測試劑盒均有各自方法的優缺點，需要進一步優化。

公開(公告)號CN108333367A的發明專利公開了一種食品過敏原特異性IgE檢測試劑盒及其應用。所述試劑盒包括磁微粒、食品過敏原、酶標抗人IgE抗體和底物；其中，所述食品過敏原修飾有生物素，所述酶標抗人IgE抗體修飾有堿性磷酸酶。該發明使用的抗原為食物抗原提取物，不同的食物致敏蛋白種類不同，如牛奶主要的致敏蛋白包括α-乳清蛋白、β-乳球蛋白及酪蛋白等，不同致敏蛋白的豐度不同。作為體外檢測用抗原食物物種的不同，采集地點不同，提取方法不同，標記條件不同等得到的致敏蛋白種類和含量差異較大。從而導致試劑盒檢測靈敏度及檢測結果差異大。