[發明專利]一種用于檢測MTRR基因和MTR基因多態性的引物組合、試劑盒以及檢測方法

有效

• 申請號: 202011546936.6
• 申請日: 2020-12-24
• 公開（公告）號: CN112553321B
• 公開（公告）日: 2022-09-30
• 發明（設計）人: 王麗穎;黃茜;陳同洋;何犇
• 申請（專利權）人: 中生北控生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 錢云

1.一種用于檢測MTRR基因和MTR基因多態性的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含引物組合，以及，探針組合；

所述引物組合分為野生型檢測體系和突變型檢測體系：

所述野生型檢測體系包括：

MTRR 66 A上游引物、MTR 2756 A上游引物、MTRR 66 下游引物、MTR 2756 下游引物、內參上游引物和內參下游引物；

所述突變型檢測體系包括：

MTRR 66 G上游引物、MTR 2756 G上游引物、MTRR 66 下游引物、MTR 2756 下游引物、內參上游引物和內參下游引物；

MTRR 66 A上游引物：5’-GCCATCGCAGAAGAACTA-3’，

MTRR 66 G上游引物：5’-GCCATCGCAGAAGAACTG-3’，

MTR 2756 A上游引物：5’-AATATGAAGATATTAGACACGA-3’，

MTR 2756 G上游引物：5’-AATATGAAGATATTAGACACGG-3’，

MTRR 66 下游引物：5’-CACTGTAACGGCTCTAACC-3’，

MTR 2756 下游引物：5’-TGTGGGCATCATCGTA-3’，

內參上游引物：5’-GCCCCCGGTTTCTATAAATTG-3’，

內參下游引物：5’-CTGGCGACGCAAAAGAAGAT-3’；

所述探針組合包括如下探針：

MTRR 66 探針：5’-AACGGCTCTAACCTTATCGG-3’，

MTR 2756 探針：5’-TCACCCAGTGAAGCCCACG-3’，

內參探針：5’-TCTCTGCTCCTCCTGTTCGACAGTCAGC-3’，

每條探針的5’端為熒光基團，3’端為淬滅基團；

所述熒光基團為熒光基團FAM、VIC、ROX、HEX或Cy5；

所述淬滅基團為BHQ或MGB。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，包括如下兩個PCR體系：

野生型PCR反應體系，包括：

MTRR 66 A上游引物150~200nM、MTR 2756 A上游引物 150~200nM、MTRR 66 下游引物150~200nM、MTR 2756 下游引物150~200nM、MTRR 66探針 150~200nM、MTR 2756 探針150~200nM、內參上游引物 150~200nM、內參下游引物 150~200nM、內參探針 150~200nM、1×PCR緩沖液、150~250μM dNTPs、MgCl₂ 300~500μM、Taq酶和UNG酶；

突變型PCR反應體系，包括：

MTRR 66 G上游引物150~200nM、MTR 2756 G上游引物 150~200nM、MTRR 66 下游引物150~200nM、MTR 2756 下游引物150~200nM、MTRR 66探針 150~200nM、MTR 2756 探針150~200nM、內參上游引物 150~200nM、內參下游引物 150~200nM、內參探針 150~200nM、1×PCR緩沖液、150~250μM dNTPs、MgCl₂ 300~500μM、Taq酶和UNG酶。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，還包括：

突變型對照品和野生型對照品。