[發明專利]一種農藥殘留快速檢測試劑盒及其制備方法

在審

• 申請號: 202011546645.7
• 申請日: 2020-12-24
• 公開（公告）號: CN112924440A
• 公開（公告）日: 2021-06-08
• 發明（設計）人: 林丹;廖瑋;羅小寶;李綺敏;陳茹;郭麗儀;鄭澤洋;楊安源;蟻碧珍;馮志強;莊俊鈺
• 申請（專利權）人: 廣東省食品工業研究所有限公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 廣州知友專利商標代理有限公司 44104
• 代理人: 李海波;劉艷麗

本發明公開了一種農藥殘留快速檢測試劑盒，主要由乙酰膽堿酯酶、底物、顯色劑和磷酸鹽緩沖溶液組成，其中所述乙酰膽堿酯酶采用新鮮海魚紅鰭鯛和/或黃花魚提取獲得，所述底物為硫代乙酰膽堿，所述顯色劑由5,5，?二硫代?2,2?二硝基苯甲酸和碳酸氫鈉組成，該試劑盒含有源自海魚紅鰭鯛和/或黃花魚的乙酰膽堿酯酶，該乙酰膽堿酯酶酶源豐富易得，且酶活好，對多種有機磷和氨基甲酸酯類農藥的靈敏度高，保存時間長，檢測限能達到相關要求。本發明還公開了上述試劑盒的制備方法，該制備方法步驟簡潔，成本低。

技術領域

本發明屬于農藥殘留快速檢測技術領域，具體涉及一種農藥殘留快速檢測試劑盒及其制備方法。

背景技術

氣相色譜、液相色譜等實驗室檢測方法是檢測農藥殘留的常規方法，靈敏度高，特異性強，但檢測費用昂貴，且受場地的限制。我國農產品通過農貿市場渠道銷售的比重近70％，流通性強，單靠實驗室檢測方法和儀器是難于及時、快速而全面地從源頭監控食品安全狀況。

根據我國當前的國情，對農副產品批發市場以及超市等食品零售網點進行食品安全監督，乃至經營商自身管理，都需要配以現場抽樣和快速檢測。現場快速檢測作為發現食品安全問題的第一步，具有不可替代的作用。

CN101503731A中公開了一種農藥殘毒快速檢測試劑盒的制備方法，是含有乙酰膽堿酯酶和丁酰膽堿酯酶混合物的農藥殘毒快速檢測試劑盒，由膽堿酯酶，底物，顯色劑(DTNB)和磷酸緩沖液組成。

中國專利文獻CN106191212A中公開了一種農藥殘毒快速檢測試劑盒，包括膽堿酯酶酶粉、底物、顯色劑和緩沖劑，膽堿酯酶酶粉為膽堿酯酶與穩定劑的復合物。

應用上述發明專利雖然在小區域范圍內解決了部分農產品的有機磷和氨基甲酸酯類的農藥殘留問題，但是上述這些專利產品存在以下缺點：膽堿酯酶制作繁瑣，制作成本高，制作時間長，難以規模化生產滿足市場需求。

發明內容

本發明的目的在于提供一種農藥殘留快速檢測試劑盒，該試劑盒含有來自海魚紅鰭鯛和/或黃花魚的乙酰膽堿酯酶，乙酰膽堿酯酶酶源豐富易得，且酶活好，對多種有機磷和氨基甲酸酯類農藥的靈敏度高，保存時間長，檢測限能達到相關要求。

本發明的目的還在于提供上述農藥殘留快速檢測試劑盒的制備方法，該制備方法步驟簡潔，成本低。

本發明的上述第一個目的可以通過以下技術方案來實現：一種農藥殘留快速檢測試劑盒，主要由乙酰膽堿酯酶、底物、顯色劑和磷酸鹽緩沖溶液組成，其中所述乙酰膽堿酯酶采用新鮮海魚紅鰭鯛和/或黃花魚提取獲得，所述底物為硫代乙酰膽堿，所述顯色劑由5,5，-二硫代-2,2-二硝基苯甲酸(DTNB)和碳酸氫鈉組成。

優選的，所述乙酰膽堿酯酶采用新鮮海魚提取獲得的具體過程包括：

(1)選取新鮮海魚紅鰭鯛和/或黃花魚的肌肉組織，與預冷后的磷酸鹽緩沖溶液進行勻漿，得到海魚肌肉組織酶液；

(2)取步驟(1)中制得的海魚肌肉組織酶液，加入表面活性劑、穩定劑和防腐劑，并用磷酸鹽緩沖液定容，得到乙酰膽堿酯酶混合液；

(3)將步驟(2)中制得的混合酶液水浴后冷卻，再離心處理，離心后取上清液，即得到乙酰膽堿酯酶酶液。

在該采用新鮮海魚提取獲得乙酰膽堿酯酶的過程中：

優選的，步驟(1)中所述磷酸鹽緩沖溶液的pH值為6.0～8.5，其與新鮮海魚的肌肉組織的用量關系為6～25mL：1g。

優選的，步驟(1)中所述磷酸鹽緩沖溶液由無水磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀用蒸餾水溶解制成，其中無水磷酸氫二鉀的濃度為10～15g/L，所述磷酸二氫鉀的濃度為2.5～4.0g/L，本申請中所采用的磷酸鹽緩沖溶液均在此范圍內。