[發明專利]一種4-硝基苯乙胺的HPLC分析方法

有效

• 申請號: 202011546500.7
• 申請日: 2020-12-24
• 公開（公告）號: CN112630347B
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 陳向明;樓金萍;丁海東;黃依依
• 申請（專利權）人: 杭州華東醫藥集團浙江華義制藥有限公司;濰坊市海欣藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 浙江千克知識產權代理有限公司 33246
• 代理人: 吳輝輝

本發明公開了一種4?硝基苯乙胺的HPLC分析方法。本發明的分析方法包括選用苯基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；采用流動相梯度洗脫，流動相的組成為磷酸二氫鉀緩沖液及乙腈；在適當流速和柱溫下進行高效液相色譜分析，記錄色譜圖。本發明能有效的洗脫、分離和定量4?硝基苯乙胺及其雜質，使雜質峰與主峰完全分離，專屬性好，分析速度快，檢測效果好。

技術領域

本發明屬于藥物分析技術領域，具體涉及4-硝基苯乙胺及其鹽的HPLC分析方法。

背景技術

4-硝基苯乙胺及其鹽是用于治療心血管和尿頻等藥物的醫藥中間體，是一種重要的精細化工中間體，在醫藥行業具有廣泛的用途，目前未見相關分析方法的報道。

4-硝基苯乙胺中，常見的雜質有五種，包括苯乙胺、2-硝基苯乙胺、3-硝基苯乙胺、N-乙酰基苯乙胺、N-乙酰基-2-(4-硝基苯)乙胺。

在行業中通常采用滴定法對4-硝基苯乙胺進行含量測定，該類方法無法有效區分其含有的雜質，也會對含量的測定結果產生干擾。部分廠家雖然采用了HPLC方法進行檢測，卻難以對異構體雜質3-硝基苯乙胺進行有效的分析控制。因此，尋找一種簡單可行，能將4-硝基苯乙胺及其存在的五種雜質依次洗脫且分離，并做定量分析的方法勢在必行。

發明內容

本發明的目的在于提供一種4-硝基苯乙胺的HPLC分析方法。本發明利用梯度洗脫的高效液相色譜法，實現了有效的洗脫、分離和定量4-硝基苯乙胺及其雜質，使雜質峰與主峰完全分離，分析速度快，檢測效果好。

為了達到上述的目的，本發明采取以下技術方案：

一種4-硝基苯乙胺及其鹽的HPLC分析方法，包括：

(1)所述4-硝基苯乙胺(Y)及其有關物質(A-E)的化學結構式如下：

(2)所述HPLC分析方法的主要參數：

a、色譜柱選用苯基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；

b、流動相梯度洗脫，其中：

流動相由流動相A和流動相B組成，其中，所述流動相A為磷酸二氫鉀緩沖液和乙腈的混合溶液，所述流動相A中磷酸二氫鉀緩沖液的濃度為0.005mol/L～0.05mol/L，pH為1.5～3.0，乙腈占比體積百分比為5％～20％；所述流動相B為乙腈；

梯度洗脫時間與流動相比例如下：