[發(fā)明專利]基于解脂耶氏酵母的發(fā)酵方法、發(fā)酵液及發(fā)酵液的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011545586.1
• 申請(qǐng)日: 2020-12-23
• 公開（公告）號(hào): CN112553094A
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊浩;朱玉華;劉燕瓊;劉建華;梁正;魏可健;來文晴;楊華威
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳市金新農(nóng)科技股份有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/16
• 分類號(hào): C12N1/16;A23K10/18;A23K50/30;A23K50/60;C12R1/645
• 代理公司: 深圳中一聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44414
• 代理人: 方良

本申請(qǐng)涉及微生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于解脂耶氏酵母的發(fā)酵方法、發(fā)酵液及發(fā)酵液的應(yīng)用。該發(fā)酵方法包括如下步驟：將解脂耶氏酵母菌種活化，得到種子液；將所述種子液置于液體培養(yǎng)基中在酸性條件下進(jìn)行攪拌發(fā)酵處理；其中，所述液體培養(yǎng)基包括：20?30g/L葡萄糖，8?16g/L酵母提取物，0.1?0.3g/L無水硫酸鎂，2?3g/L磷酸二氫鉀；所述攪拌發(fā)酵處理的過程中，溶氧濃度保持在20％?40％，當(dāng)溶氧濃度低于20％時(shí)，加甘油和酵母蛋白胨。該發(fā)酵方法可以減少染菌風(fēng)險(xiǎn)，而且發(fā)酵程度高，可顯著提高發(fā)酵產(chǎn)物中的解脂耶式酵母菌細(xì)胞干重，因此具有很好的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請(qǐng)屬于微生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于解脂耶氏酵母的發(fā)酵方法、發(fā)酵液及發(fā)酵液的應(yīng)用。

背景技術(shù)

解脂耶氏酵母(Yarrowia Iipolytica)是一種優(yōu)良的脂肪酶及單細(xì)胞蛋白生產(chǎn)菌。該酵母具有以下特點(diǎn)：(1)被美國(guó)食品藥品管理局認(rèn)定是安全菌株(GenerallyRegarded as Safe，GRAS)，在食品、醫(yī)藥、飼料工業(yè)上具有廣泛的應(yīng)用前景；(2)能合成大量的胞內(nèi)蛋白質(zhì)，并且能夠分泌蛋白酶等；(3)生長(zhǎng)周期短、容易培養(yǎng)，且菌體蛋白質(zhì)含量高，是良好的飼料酵母。

解脂耶式酵母表達(dá)系統(tǒng)安全可靠，無抗性基因、無缺失蛋白酶，能經(jīng)濟(jì)高效表達(dá)活性分子，具備產(chǎn)業(yè)化開發(fā)前景。但目前脂耶式酵母發(fā)酵工藝采用的是常規(guī)分批發(fā)酵法發(fā)酵，其發(fā)酵程度低、易染菌，不利于工業(yè)大規(guī)模生產(chǎn)。

因此，相關(guān)技術(shù)有待改進(jìn)。

發(fā)明內(nèi)容

本申請(qǐng)的目的在于提供一種基于解脂耶氏酵母的發(fā)酵方法、發(fā)酵液及發(fā)酵液的應(yīng)用，旨在解決現(xiàn)有脂耶式酵母發(fā)酵工藝發(fā)酵程度低、易染菌的技術(shù)問題。

為實(shí)現(xiàn)上述申請(qǐng)目的，本申請(qǐng)采用的技術(shù)方案如下：

第一方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N基于解脂耶氏酵母的發(fā)酵方法，包括如下步驟：

將解脂耶氏酵母菌種活化，得到種子液；

將所述種子液置于液體培養(yǎng)基中在酸性條件下進(jìn)行攪拌發(fā)酵處理；

其中，

所述液體培養(yǎng)基包括：20-30g/L葡萄糖，8-16g/L酵母提取物，0.1-0.3g/L無水硫酸鎂，2-3g/L磷酸二氫鉀；

所述攪拌發(fā)酵處理的過程中，溶氧濃度保持在20％-40％，當(dāng)溶氧濃度低于20％時(shí)，添加甘油和酵母蛋白胨。

本申請(qǐng)?zhí)峁┑陌l(fā)酵方法是一種基于解脂耶式酵母的高密度發(fā)酵方法，通過選用合適的培養(yǎng)基，在酸性條件下持續(xù)進(jìn)行攪拌發(fā)酵，攪拌發(fā)酵過程溶氧濃度始終保持在20％-40％，且當(dāng)溶氧濃度低于20％補(bǔ)充甘油和酵母蛋白胨，補(bǔ)料中酵母蛋白胨能補(bǔ)充能量，而甘油能抑制大量絲狀解脂耶式酵母形成，使更適合高密度發(fā)酵和產(chǎn)生目的蛋白的球狀解脂耶式酵母更好地生長(zhǎng)，同時(shí)甘油能抑制其他雜菌生長(zhǎng)，這樣可以減少染菌風(fēng)險(xiǎn)；該發(fā)酵方法發(fā)酵程度高，可顯著提高發(fā)酵產(chǎn)物中的解脂耶式酵母菌細(xì)胞干重，因此具有很好的應(yīng)用前景。

第二方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N發(fā)酵液，所述發(fā)酵液通過本申請(qǐng)所述的發(fā)酵方法進(jìn)行發(fā)酵得到。

本申請(qǐng)?zhí)峁┑陌l(fā)酵液由本申請(qǐng)?zhí)赜械陌l(fā)酵方法進(jìn)行發(fā)酵得到。因此，該發(fā)酵液發(fā)酵程度高，雜菌少，而且解脂耶式酵母菌細(xì)胞干重高，具有很好的應(yīng)用前景。

第三方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N應(yīng)用，即本申請(qǐng)所述的發(fā)酵液在豬飼料中的應(yīng)用。

本申請(qǐng)通過對(duì)該發(fā)酵液拌料飼喂和飲水添加飼喂評(píng)估其對(duì)斷奶仔豬的作用效果，結(jié)果顯示顯著提高了試驗(yàn)仔豬體重，并且在試驗(yàn)期間仔豬未出現(xiàn)腹瀉情況，對(duì)于仔豬日采食量和平均日增重均有提高的趨勢(shì)，因此具有提高仔豬免疫力和促進(jìn)生長(zhǎng)的作用，可以很好地用于豬飼料中。

附圖說明