[發(fā)明專利]一種用于檢測毛發(fā)中毒品的試劑盒及其檢測方法

在審

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• 申請日: 2020-12-24
• 公開（公告）號: CN112748240A
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹丹;成舜
• 申請（專利權(quán)）人: 南京北成光生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/58;G01N21/76;G01N21/27
• 代理公司: 南京瑞華騰知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32368
• 代理人: 錢麗

本發(fā)明公開了一種用于檢測毛發(fā)中毒品的試劑盒，包括裂解液、檢測試劑；其中裂解液包括PH在7?9的10mM PBS緩沖液、20mM DTT以及100ug/mL的蛋白酶K；所述檢測試劑包括DNA1?Met抗原偶聯(lián)物、DNA2?Met抗體偶聯(lián)物、DNA3以及氧化石墨烯結(jié)合抗氧化劑；本發(fā)明檢測方法包括：S1：試劑配制；S2：預(yù)處理；S3：反應(yīng)一；S4：反應(yīng)二；S5：檢測。本發(fā)明試劑盒操作簡單，針對毛發(fā)進(jìn)行毒品檢測，在5分鐘左右出檢測報告，一次性可檢驗(yàn)一種或多種毒品，適合篩選。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于毒品檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于檢測毛發(fā)中毒品的試劑盒及其檢測方法。

背景技術(shù)

目前針對吸毒人員快速排查的生物檢測樣本主要有尿液、唾液和毛發(fā)。與尿液和唾液相比，毛發(fā)檢材具有性質(zhì)穩(wěn)定、取材方便、易于保存、檢出時限長、適用范圍廣、污染機(jī)會少等優(yōu)勢。毒品在毛發(fā)中的代謝較慢，檢測窗口期長可達(dá)到半年，對取樣過程便于監(jiān)督，可防止檢材被摻假或調(diào)換。毛發(fā)中痕量毒品快速檢測技術(shù)主要有酶聯(lián)免疫(ELISA)、膠體金、時間分辨熒光免疫層析和量子點(diǎn)免疫層析技術(shù)。上述技術(shù)無法時間快速檢測(小于10分鐘)、特異性強(qiáng)、靈敏度高(達(dá)到0.2ng/mg)、可追溯時間長的要求。

為解決上述技術(shù)的不足，我司研發(fā)均相發(fā)光檢測技術(shù)。利用鄰位觸及原理實(shí)現(xiàn)均相免疫檢測，同時使用DNA輔助蛋白檢測的方法，將對于大分子蛋白的檢測轉(zhuǎn)換為對核酸的檢測，結(jié)合各種成熟的核酸放大策略，大大提高了檢測的靈敏度。在光電檢測方面，本項(xiàng)目采用獨(dú)特的測量模塊，由光子計(jì)數(shù)探測器與計(jì)數(shù)單元組成。采用智能控制，樣本與試劑溫育結(jié)束后通過PMT自動捕獲、放大光量子，進(jìn)行信號轉(zhuǎn)換與標(biāo)準(zhǔn)曲線法分析，得到樣本中待檢物的濃度數(shù)據(jù)，最快5分鐘內(nèi)出第一個檢測結(jié)果，可連續(xù)批量加樣，批量出結(jié)果。

相對于現(xiàn)有毒品檢測手段，本項(xiàng)目在準(zhǔn)確性、快速出結(jié)果(最快5分鐘出結(jié)果)、高通量、降低成本(大幅降低綜合費(fèi)用50％以上)、可現(xiàn)場操作等方面具備較大創(chuàng)新性，解決了毒品檢測行業(yè)定性落后、手動操作繁瑣、檢測費(fèi)用高這三個痛點(diǎn)，契合毒品檢測的需求。

本發(fā)明所述的毒品包括但不僅限于中06-單乙酰嗎啡、嗎啡、可待因、MAMP、AMP、MDMA、MDA、MDEA、可卡因、苯甲酰愛康寧、氯胺酮、去甲氯胺酮、9-四氫大麻酚、大麻二酚和大麻酚等。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種用于檢測毛發(fā)中毒品的試劑盒及其檢測方法，以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種用于檢測毛發(fā)中毒品的試劑盒，包括裂解液、檢測試劑；

其中裂解液包括PH在7-9的10mM PBS緩沖液、20mM DTT以及100ug/mL的蛋白酶K；

所述檢測試劑包括DNA1-Met抗原偶聯(lián)物、DNA2-Met抗體偶聯(lián)物、DNA3以及氧化石墨烯結(jié)合抗氧化劑(GO-AOD)；

所述DNA1-Met抗原偶聯(lián)物的序列如下：

SEQ ID NO.1：5’-ACGCTGAGTTATCAACGACTTTTTTTATCACATCAGGCTCTAGCGTATGCTATTG-NH2C7-3’；

所述DNA2-Met抗體偶聯(lián)物的序列如下：

SEQ ID NO.2：5’-NH2C6-TACGTCCAGAACTTTACCAAACCACACCCTTTTTTTGTCGTTGGCTGAGATTC-3’；

所述DNA3的序列如下：

SEQ ID NO.3：5’-AE-NH2C6-CGATCTCAGCAACTCAGCAGCG-3’。

一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測毛發(fā)中毒品的方法，按照先后順序包括以下步驟：