[發明專利]用于改善免疫療法的重組溶瘤腺病毒及其應用

在審

• 申請號: 202011541464.5
• 申請日: 2020-12-23
• 公開（公告）號: CN114657150A
• 公開（公告）日: 2022-06-24
• 發明（設計）人: 繩紀坡;陳璨;張慶勇;胡放
• 申請（專利權）人: 北京康萬達醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;C12N15/113;C12N15/12;A61K35/761;A61K39/00;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 北京天昊聯合知識產權代理有限公司 11112
• 代理人: 王靜;高釗

本發明提供了一種用于改善免疫療法的重組溶瘤腺病毒及其應用。該重組溶瘤腺病毒為選擇復制型溶瘤腺病毒，其基因組中攜帶有能夠在腫瘤細胞和/或癌細胞中抑制PDL1表達的外源shRNA的編碼序列以及外源抗原的編碼序列；其中所述外源抗原為包含CD19抗原表位的蛋白，并且所述外源抗原能夠經表達而修飾在所述腫瘤細胞和/或癌細胞的表面，并能被靶向所述外源抗原的免疫治療藥物特異性識別。該重組溶瘤腺病毒既能夠解除或減弱腫瘤細胞對免疫細胞(包括體內免疫細胞和/或過繼免疫細胞(如果施予的話))的抑制作用，還能夠與靶向CD19的免疫治療藥物聯合來治療腫瘤和/或癌癥，顯示出顯著的協同效果。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體而言，涉及包含用于改善免疫療法的重組溶瘤腺病毒及其用途、包含重組溶瘤腺病毒和免疫治療藥物的治療劑及其用途、治療腫瘤和/或癌癥的方法。

背景技術

腫瘤治療研究發展至今，人類干預腫瘤發展的手段經歷了手術、放療、化療、靶向治療和生物治療等五個階段，前面四種治療手段相互結合，在大多數種類的腫瘤治療上形成了較為成熟的治療方案，在很大程度上能夠遏制腫瘤的發展，但是一旦復發轉移，臨床醫生將陷于束手無策的狀態。

隨著近些年來生物醫學技術的迅猛發展，以細胞治療和免疫治療為主的生物治療手段的出現，讓腫瘤病人再一次看到了新的希望。CAR-T技術的悄然出現和日益成熟代表著世界上最先進的細胞治療手段，尤其它在血液系統腫瘤治療領域取得的巨大成功讓臨床醫生們備受鼓舞。但是CAR-T細胞過繼性輸注治療血液瘤后仍舊會有大比例復發，以及當人們嘗試利用CAR-T細胞來治療實體瘤時也收效甚微。經過大量研究發現，前者血液系統腫瘤在經過過繼性CAR-T細胞治療后復發的主要原因在于腫瘤的異質性，例如在利用CD19 CAR-T細胞治療非霍奇金淋巴瘤或急性淋巴細胞白血病時，并不是所有的腫瘤細胞都高表達CD19，在高表達CD19的腫瘤細胞被CD19 CAR-T細胞清除掉后，低表達或者不表達CD19的腫瘤細胞就會慢慢地擴增出來，從而導致復發；而后者在利用CAR-T細胞治療實體瘤時收效甚微，一方面用作CAR-T細胞靶標的腫瘤細胞表面特異性蛋白不易獲得，還有不容小覷的另一個原因就是腫瘤細胞來源的免疫檢查點蛋白對免疫細胞產生的免疫抑制很大程度上限制了腫瘤周圍免疫細胞的活性，甚至能夠抑制病人整個免疫系統的活性。除CAR-T細胞治療之外，目前也已開發了其它靶向CD19的免疫治療藥物及方法，包括雙抗、ADC、Fc工程化抗體等，在臨床試驗中取得了令人鼓舞的結果；但對于實體瘤的治療，仍尚未看到明確的臨床療效。

溶瘤病毒療法屬于生物治療的范疇。溶瘤病毒是指感染腫瘤細胞后能夠選擇性地在靶細胞內復制，最終導致腫瘤細胞裂解和死亡的一類病毒。這類病毒依靠其本身的特異性在腫瘤細胞中復制來裂解腫瘤細胞，細胞裂解后釋放出來的病毒又可以進一步感染周圍的腫瘤細胞，同時對正常細胞和組織則沒有破壞作用，或影響較小。溶瘤病毒一般分為二類：一類為野生型病毒和自然變異的弱毒病毒株，這類病毒天然就對某些腫瘤細胞有親和力，如呼腸孤病毒、新城疫病毒以及自主復制的細小病毒等，這些病毒能夠在某些腫瘤細胞中繁殖并裂解細胞，具有天然的特異性溶瘤活性；另一類是對病毒基因組進行改造后，只能在腫瘤細胞內復制的病毒。目前人們已經通過基因工程方法改造了腺病毒、單純皰疹病毒、流感病毒和人牛痘病毒等。其中腺病毒是溶瘤病毒研究開展相對較早溶瘤機理研究相對較為清楚的，腺病毒中又以5型腺病毒研究得更為清楚。我國在2006年批準上市了上海三維生物技術有限公司研發的一種具有溶瘤作用的重組人5型腺病毒H101(一種刪除了E1B55K和E3基因的溶瘤腺病毒)(NDA號為：國藥準字S20060027)，可以實現在p53突變型的腫瘤細胞中特異性復制并溶解腫瘤細胞。溶瘤腺病毒日益成為惡性腫瘤治療的一種新手段。

目前在腫瘤和/或癌癥的免疫治療中，仍然需要更加有效的治療方案和由此開發出的藥物。

發明內容

為解決上述現有技術中所存在的問題，本發明提供了分離的重組溶瘤腺病毒及其用途、包含重組溶瘤腺病毒和免疫細胞的治療劑及其用途、治療腫瘤和/或癌癥的方法。

具體而言，本發明提供了：