[發(fā)明專利]一種克魯維酵母及其在生產(chǎn)木糖醇中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011539601.1
• 申請(qǐng)日: 2020-12-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112522121B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-02-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張?zhí)煸?/a>;李振
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州聚維元?jiǎng)?chuàng)生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/16
• 分類號(hào): C12N1/16;C12N1/36;C12N1/02;C12P7/18;C07C29/74;C07C31/18;C12R1/645
• 代理公司: 天津市君硯知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12239
• 代理人: 張東浩

1.一種克魯維酵母，其特征在于所述克魯維酵母為暹羅克魯維酵母（Kluyveromyces siamensis THUZTY2041），保藏日期： 2020年10月19日，保藏單位為中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心（CGMCC），保藏地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，保藏編號(hào)CGMCC NO. 20917。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的克魯維酵母，其特征在于所述克魯維酵母為克魯維酵母的18srDNA序列如SEQ ID NO. 1所示。

3.權(quán)利要求1所述的克魯維酵母在生產(chǎn)木糖醇中的應(yīng)用。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述克魯維酵母以含有秸稈糖發(fā)酵尾液的培養(yǎng)基發(fā)酵生產(chǎn)木糖醇。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述克魯維酵母通過(guò)如下步驟進(jìn)行木糖醇的發(fā)酵生產(chǎn)：

（1）克魯維酵母發(fā)酵培養(yǎng)基的制備：以秸稈糖為碳源發(fā)酵培養(yǎng)不具備木糖代謝能力的微生物，發(fā)酵結(jié)束后固液分離，測(cè)定尾液中木糖的濃度，根據(jù)木糖的濃度濃縮或稀釋發(fā)酵尾液，使發(fā)酵尾液中木糖初始濃度為18-30 g/L，添加2 g/L酵母粉與25 g/L海鹽，制得克魯維酵母發(fā)酵發(fā)酵培養(yǎng)基；

（2）種子液的制備：將克魯維酵母的菌種斜面制成菌懸液接入種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，制得種子液；

（3）發(fā)酵生產(chǎn)木糖醇：將上述所得種子液接入發(fā)酵培養(yǎng)基克魯維酵母發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種量為10% v/v，待克魯維酵母充分利用發(fā)酵尾液中的糖分積累木糖醇后，離心或板框壓濾去除菌體得到發(fā)酵清液，即木糖醇母液；

（4）木糖醇母液依次經(jīng)脫色、脫鹽、蒸發(fā)濃縮、結(jié)晶與離心，得到木糖醇產(chǎn)品。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述步驟（1）中，克魯維酵母發(fā)酵發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：木糖初始濃度為18-30 g/L的秸稈糖發(fā)酵尾液、2 g/L酵母粉、25 g/L海鹽；滅菌條件為115℃，保溫15 min；

所述發(fā)酵尾液中葡萄糖濃度不高于2 g/L、木糖濃度為28-30 g/L、氮的濃度為220-500mg/L、磷的濃度為25-60 mg/L、木質(zhì)素濃度低于100 mg/L；

所述不具備木糖代謝能力的微生物為谷氨酸棒狀桿菌、小球藻、釀酒酵母中的一種；

所述秸稈糖為小麥秸稈糖、玉米秸稈糖、水稻秸稈糖中的一種。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述步驟（1）中，不具備木糖代謝能力的微生物以秸稈糖為碳源，經(jīng)種子培養(yǎng)、發(fā)酵得到秸稈糖發(fā)酵尾液，濃縮或稀釋使所得秸稈糖發(fā)酵尾液中木糖初始濃度為18-30 g/L。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述步驟（2）的培養(yǎng)條件為：30℃恒溫培養(yǎng)24 h，振蕩速率為200 轉(zhuǎn)/分鐘；其中種子培養(yǎng)基配方為：葡萄糖10 g/L，酵母粉2 g/L，海水晶25 g/L，尿素0.7715 g/L、 磷酸氫二鉀·3H₂O 0.264 g/L、MgSO₄·2H₂O 0.075 g/L、CaCl₂·2H₂O 0.036 g/L、檸檬酸 0.006 g/L、檸檬酸鐵銨 0.006 g/L，H₃BO₃ 2.86 mg/L、MnCl₄·4H₂O 1.86 mg/L、ZnSO₄·7H₂O 0.22 mg/L、CuSO₄·5H₂O 0.08 mg/L、Na₂MoO₄·2H₂O0.39 mg/L、CO(NO₃)₂·6H₂O 0.05 mg/L；高溫高壓滅菌，滅菌條件為115℃，保溫15 min。