[發明專利]一種毛發中苯丙胺類毒品的檢測試劑盒及其檢測方法

有效

• 申請號: 202011539103.7
• 申請日: 2020-12-23
• 公開（公告）號: CN112763289B
• 公開（公告）日: 2022-11-01
• 發明（設計）人: 徐華莉;吳海芬;胡春娟;王旻子;魏建良;張明洲
• 申請（專利權）人: 浙江迪恩生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N33/569;G01N33/531
• 代理公司: 杭州裕陽聯合專利代理有限公司 33289
• 代理人: 顧晨

1.一種毛發中苯丙胺類毒品的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括：包被有分子馬達-苯丙胺抗原生物傳感器的酶標板、苯丙胺抗體、啟動液、苯丙胺標準品、溶解液、顯色劑、清洗液、終止液、處理液AG與處理液BG；所述的顯色劑由過氧化氫或過氧化脲、鄰苯二胺或四甲基聯苯胺與穩定劑K按體積比5：1混合而成；所述的終止液為1.8-2.5mol/L的鹽酸溶液，所述處理液AG為0.005-0.02M NaOH、處理液BG為0.005-0.05M HCl；所述包被有分子馬達-苯丙胺抗原生物傳感器的酶標板為用包被緩沖液將分子馬達-苯丙胺抗原生物傳感器進行1.0×10⁴倍稀釋，每孔加入100μL，包被；甩掉液體，用清洗液洗滌，拍干；在每孔中加入200μL封閉液，封閉，甩掉孔內所有液體，干燥后用鋁箔袋密封保存；所述分子馬達-苯丙胺抗原生物傳感器的構建方法包括以下具體步驟：

A）HRP辣根過氧化物酶標記：取chromatophores離心，將沉淀物重懸于Tricine-NaOH，氯化鎂， KCl，pH 6-7的緩沖液中，加入HRP辣根過氧化物酶，室溫避光孵育；然后置于PBS緩沖液中透析，每天換液多次；

B）分子馬達-苯丙胺抗原生物傳感器構建：

1）取β亞基抗體，加入碳酸鹽緩沖液、生物素Biotin，室溫搖床，然后加入streptavidin室溫反應；置于PBS緩沖液中透析，中間換液多次；

2）取甲基苯丙胺，加入碳酸鹽緩沖液、生物素Biotin，室溫搖床，透析多次，每次3.5-5.5h；

3）取 HRP辣根過氧化物酶標記的chromatophores，加入步驟（1）得到的溶液，再加入PBS，室溫搖床；離心，重復多次；棄去上清，用PBS緩沖液稀釋，加入步驟（2）得到的溶液，室溫搖床；離心，重復多次，棄去上清，加入 PBS緩沖液，加入甘油，冷凍保存；即得到分子馬達-苯丙胺抗原生物傳感器。

2.根據權利要求1所述的一種毛發中苯丙胺類毒品的檢測試劑盒，其特征在于，所述的苯丙胺抗原為苯丙胺與載體蛋白BSA偶聯制得；苯丙胺抗體為多抗，通過苯丙胺與OVA偶聯作為免疫原免疫新西蘭大白兔制得。

3.根據權利要求1所述的一種毛發中苯丙胺類毒品的檢測試劑盒，其特征在于，所述的清洗液為0.05%-0.5%吐溫-20磷酸鹽緩沖液。

4.根據權利要求1所述的一種毛發中苯丙胺類毒品的檢測試劑盒，其特征在于，所述的苯丙胺標準品用磷酸鹽緩沖液配置成濃度分別為0ng/mL、0.5ng/mL、1.5ng/mL、4.5ng/mL、13.5ng/mL、40.5ng/mL的溶液。

5.根據權利要求1所述的一種毛發中苯丙胺類毒品的檢測試劑盒，其特征在于，所述的溶解液為含酶穩定劑AH和酶保護劑KEN的磷酸鹽緩沖液。

6.根據權利要求1所述的一種毛發中苯丙胺類毒品的檢測試劑盒，其特征在于，所述的啟動液為分子馬達啟動液。

7.一種毛發中苯丙胺類毒品的檢測方法，其特征在于，使用權利要求1-6任一項所述的試劑盒對毛發進行檢測。