[發(fā)明專利]一種Tris-HCl溶液的應(yīng)用及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011531522.6
• 申請日: 2020-12-22
• 公開（公告）號: CN112695069A
• 公開（公告）日: 2021-04-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田曉飛;張秀梅;封文萍
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江海洋大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/42
• 分類號: C12Q1/42
• 代理公司: 北京睿智保誠專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11732
• 代理人: 王燦

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種Tris?HCl溶液的應(yīng)用及其制備方法。本發(fā)明所述的Tris?HCl溶液用于浮游動(dòng)物的短期保存中，保存7天后檢測浮游動(dòng)物的蛋白酶活力時(shí)發(fā)現(xiàn)，保存7天的浮游動(dòng)物的蛋白酶活力較活體樣本并無顯著差異。對大批量檢測浮游生物具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種Tris-HCl溶液的應(yīng)用及其制備方法。

背景技術(shù)

浮游動(dòng)物在水域生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)和能量循環(huán)過程中扮演著非常重要的角色。在自然界中，浮游動(dòng)物的種群極易受到外界環(huán)境因子的影響。其中，食物條件是最主要的環(huán)境因子之一。在不良的食物條件下，浮游動(dòng)物通過提高對關(guān)鍵營養(yǎng)物質(zhì)和能量的消化吸收能力來提高存活率。同時(shí)，也有研究表明，浮游動(dòng)物的消化酶活力對于適應(yīng)不良食物環(huán)境具有重要作用。因此，開展不同食物條件下，浮游動(dòng)物的消化酶活力研究，對于探究浮游動(dòng)物種群對于不同食物環(huán)境的適應(yīng)性就顯得尤為必要。但是，由于消化酶易分解的特性，研究人員在進(jìn)行消化酶測量的時(shí)候，需要即時(shí)取樣即時(shí)檢測，并且目前浮游動(dòng)物常用的熒光蛋白檢測方法周期長(每12樣品需要約3小時(shí))，這就限制了實(shí)驗(yàn)樣品的數(shù)量，從而制約了大樣本實(shí)驗(yàn)的開展。

另外，傳統(tǒng)的浮游動(dòng)物利用95％的乙醇(Ethanol)來保存熒光法蛋白酶檢測用浮游動(dòng)物，由于高濃度乙醇(Ethanol)(70％)會(huì)導(dǎo)致抱卵成體的卵釋放(Black and Dodson2003)，從而導(dǎo)致樣品的總蛋白含量降低。因此，使用高濃度乙醇(Ethanol)保存抱卵成體會(huì)人為增高蛋白酶的活力，會(huì)降低測量的準(zhǔn)確性。并且使用高濃度乙醇保存，須在蛋白酶測量前將樣品移出再次清洗，在此過程中會(huì)增加樣品與外界接觸的機(jī)會(huì)，增加蛋白酶的分解幾率。因此，開發(fā)一種對浮游動(dòng)物蛋白酶活力無影響的溶液用于浮游生物的短期保存，對大批量檢測浮游生物具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種對浮游動(dòng)物蛋白酶活力無影響的短期保存浮游生物的溶液及其制備方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種Tris-HCl溶液在浮游動(dòng)物短期保存中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了一種所述Tris-HCl溶液的制備方法，包括以下步驟：

(1)將Trizima base試劑溶于水中，得到摩爾濃度為0.04～0.06mol/L的Tris溶液；

(2)用鹽酸調(diào)節(jié)步驟(1)Tris溶液的pH值，得到Tris-HCl溶液。

作為優(yōu)選，所述Tris溶液的摩爾濃度為0.05mol/L。

作為優(yōu)選，所述鹽酸的摩爾濃度為0.5～1.5mol/L。

作為優(yōu)選，所述鹽酸的摩爾濃度為1.0mol/L。

作為優(yōu)選，所述pH值為7.9～8.1。

本發(fā)明提供了一種Tris-HCl溶液的應(yīng)用及其制備方法，本發(fā)明的技術(shù)方案具有以下優(yōu)點(diǎn)：

本發(fā)明的方法不僅改善了傳統(tǒng)的消化酶測量時(shí)即取即測的模式，提高了實(shí)驗(yàn)設(shè)置的靈活性和樣本量，還不會(huì)造成抱卵成體的卵釋放，而且本發(fā)明使用的保存液即為蛋白酶測量的緩沖溶液，解凍后即可使用，保證樣品無須再次接觸外界，具備降低蛋白酶分解風(fēng)險(xiǎn)等優(yōu)點(diǎn)，可為開展浮游動(dòng)物消化吸收能力研究提供方便實(shí)用的樣品保存方法，因此可認(rèn)為該方法具備多種優(yōu)點(diǎn)，適合于在本領(lǐng)域推廣應(yīng)用，其科研意義重大。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明提供的技術(shù)方案進(jìn)行詳細(xì)的說明，但是不能把它們理解為對本發(fā)明保護(hù)范圍的限定。

實(shí)施例1