[發明專利]一種表達靶向IgE的shRNA和/或shRNA-miR的多能干細胞或其衍生物

在審

• 申請號: 202011526228.6
• 申請日: 2020-12-22
• 公開（公告）號: CN114657134A
• 公開（公告）日: 2022-06-24
• 發明（設計）人: 王淋立;陳月花;莫健;楊建國
• 申請（專利權）人: 未來智人再生醫學研究院（廣州）有限公司;王淋立
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/113;A61K35/545;A61K35/30;A61K35/28;A61P11/06;A61P37/08
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 胡輝

1.一種多能干細胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干細胞或其衍生物的基因組導入有靶向IgE的shRNA和/或shRNA-miR的表達序列。

2.根據權利要求1所述的多能干細胞或其衍生物，其特征在于：所述靶向IgE的shRNA和/或shRNA-miR的靶序列如SEQ ID NO.101～SEQ ID NO.103所示。

3.根據權利要求1所述的多能干細胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干細胞或其衍生物的B2M和/或CIITA基因被敲除。

4.根據權利要求1所述的多能干細胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干細胞或其衍生物的基因組中還導入有第一核酸分子；

且所述多能干細胞或其衍生物中的免疫應答相關基因的3’UTR區域導入有第二核酸分子；所述第一核酸分子編碼介導RNA干擾的小核酸分子，所述小核酸分子特異性靶向第二核酸分子的轉錄產物，且所述小核酸分子不靶向所述多能干細胞或其衍生物的任何其他的mRNA或lncRNA。

5.根據權利要求4所述的多能干細胞或其衍生物，其特征在于，所述小核酸分子包括短干擾核酸、短干擾RNA、雙鏈RNA，優選為miRNA、shRNA、shRNA-miR中的至少一種。

6.根據權利要求5所述的多能干細胞或其衍生物，其特征在于，所述多能干細胞或其衍生物來源于人類；所述小核酸分子的序列為不靶向人類任何mRNA或lncRNA的非人類物種的隨機序列。

7.根據權利要求4所述的多能干細胞或其衍生物，其特征在于，所述第二核酸分子包括至少3個重復的小核酸分子序列的反向互補序列，優選為6～10個重復的小核酸分子序列的反向互補序列。

8.根據權利要求1所述的多能干細胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干細胞或其衍生物的基因組還導入一種或多種免疫兼容分子表達序列，所述免疫兼容分子用于調控多能干細胞細胞或其衍生物中與免疫應答相關的基因的表達。

9.根據權利要求4或8所述的多能干細胞或其衍生物，其特征在于：所述與免疫應答相關的基因包括：

(1)主要組織相容性復合體基因，包括HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DRA、HLA-DRB1、HLA-DRB3、HLA-DRB4、HLA-DRB5、HLA-DQA1、HLA-DQB1、HLA-DPA1和HLA-DPB1中的至少一種；

(2)主要組織相容性復合體相關基因，包括B2M和CIITA中的至少一種。

10.根據權利要求8所述的多能干細胞或其衍生物，其特征在于：所述免疫兼容分子包括以下的任一種或多種：

(1)免疫耐受相關基因，包括CD47或HLA-G；

(2)HLA-C類分子，包括人群中比例合計超過90％的HLA-C復等位基因，或者超過90％的HLA-C復等位基因與B2M構成的融合蛋白基因；

(3)靶向主要組織相容性復合體基因的shRNA和/或shRNA-miR，所述主要組織相容性復合體基因包括HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DRA、HLA-DRB1、HLA-DRB3、HLA-DRB4、HLA-DRB5、HLA-DQA1、HLA-DQB1、HLA-DPA1和HLA-DPB1中的至少一種；

(4)靶向主要組織相容性復合體相關基因的shRNA和/或shRNA-miR，所述主要組織相容性復合體相關基因包括B2M和CIITA中的至少一種。