[發明專利]一種新的低血磷性佝僂病致病基因及其應用

有效

• 申請號: 202011525056.0
• 申請日: 2020-12-21
• 公開（公告）號: CN112626195B
• 公開（公告）日: 2022-05-10
• 發明（設計）人: 黃志玲
• 申請（專利權）人: 黃志玲
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明揭示了發生g.[7785?7788delGTGA]突變的MSH6突變基因為HR的新的致病基因，MSH6突變基因的突變片段序列如SEQ ID NO：1所示。擁有SEQ ID NO：1所示序列的MSH6突變基因二倍體純合基因型會導致人類低血磷性佝僂病的發生，擁有SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2?SEQ ID NO：4所示序列中的任一個MSH6突變基因組成的二倍體雜合基因型也會導致人類低血磷性佝僂病的發生，且均呈常染色體隱性遺傳。在此基礎上，本發明提供了基于PCR捕獲測序以及基于常規PCR和Sanger測序的兩種突變檢測試劑盒，這些對于HR的篩查、診斷、生育指導具有重要的意義，特別是有助于從源頭上杜絕HR患兒的出生。此外，對于MSH6基因特定突變的揭示也有助于HR發病機制的探究以及治療藥物和方法的開發。

技術領域

本發明涉及醫學分子生物學領域，具體涉及一種新的低血磷性佝僂病致病基因及其檢測試劑盒。

背景技術

低血磷性佝僂病(Hypophosphatemic Rickets，HR)是抗維生素D性佝僂病的主要類型，由于HR患者腎小管對磷的回收能力減弱，將會出現低血磷及維生素D代謝障礙，輕則導致低磷酸鹽血癥，重則發展成佝僂病或骨軟化病等，還會累及聽力和牙齒等。兒童HR主要表現為生長發育遲緩、身材矮小、佝僂病、骨骼及牙齒畸形，骨質疏松，行走無力等；成人HR主要是造成軟骨病和骨關節畸形。生化檢查顯示HR患者的血磷明顯降低，堿性磷酸酶明顯升高，X線檢查下呈現佝僂病骨格。HR是一種單基因遺傳病，之前發現的病例主要以X-性連鎖顯性遺傳為主，目前比較明確的致病基因是X染色體上的PHEX突變基因，然而其具體的致病機制尚未被揭示。因此除臨床體征和生化檢查外，HR的鑒別診斷還需要結合明確的家族史及遺傳分析。HR致畸、致殘率高，會嚴重影響患者的身體健康，并會給家庭和社會造成沉重的負擔。目前HR治療以補充維生素D類似物和磷劑為主，然而治療效果有限，因此對于HR歸根結底還是應該遵循遺傳學疾病以預防為主的原則，加強致病基因攜帶者篩查、生育指導和產前診斷，杜絕HR患兒的出生。因而揭示HR的致病基因對于HR的篩查、診斷、生育咨詢、治療藥物和方法的開發具有重要的意義。

發明人前期收集6例家族性HR病例，對家系中的HR成員和相關正常成員進行了目標基因區域捕獲測序，通過關聯分析首次揭示了部分HR患者中存在著MSH6基因的特定突變(包括g.[7785-7788delGTGA]、g.[7957inAA]、g.[12759inTTAAG]和g.[12907inCAGC]共4種突變)；并通過突變片段擴增和Sanger測序以及家系遺傳分析，在HR人群和非HR人群中證實了所發現的4種新的MSH6突變基因均為HR的致病基因，且均呈常染色體隱性遺傳模式。MSH6基因編碼蛋白屬于錯配修復蛋白，又稱為G/T錯配結合蛋白(G/T mismatch bindingprotein，GTBp)，具有參與DNA堿基錯配修復的功能，能參與識別并結合到錯配位點后啟動修復，再在其它錯配修復相關酶的作用下共同完成錯配位點的修復過程，已有研究顯示該基因可能在腫瘤的發生發展中發揮作用，然而尚無研究報道顯示該基因與HR存在關聯，也無該基因跟磷的體內吸收和代謝相關的研究報道。

發明內容

本發明提供了MSH6基因的4種致病突變基因形式，并在此基礎上提供了MSH6突變基因的檢測試劑盒。

本發明解決其技術問題所采用的技術方案如下：