[發(fā)明專利]hsa_circ_0008961作為痛風(fēng)診斷標(biāo)志物的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011523907.8
• 申請日: 2020-12-10
• 公開（公告）號: CN112522391B
• 公開（公告）日: 2023-06-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 青玉鳳;張全波;戴菲;黃玉琴;鄭建雄;唐乙萍;董曾榮;周聞君
• 申請（專利權(quán)）人: 川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明具體涉及hsa_circ_0008961作為痛風(fēng)診斷標(biāo)志物的應(yīng)用。circRNA在痛風(fēng)的發(fā)生發(fā)展過程中具有重要的生理作用，為了進一步明確circRNA在痛風(fēng)中的調(diào)節(jié)機制，開發(fā)具有痛風(fēng)診斷意義的circRNAs。本發(fā)明通過基因芯片技術(shù)篩選分析了痛風(fēng)患者和健康對照者外周血單個核細(xì)胞中差異表達的circRNA，并通過實時熒光定量PCR驗證了芯片結(jié)果，表明hsa_circ_0008961可作為痛風(fēng)診斷的生物標(biāo)志物，公開的相應(yīng)試劑或試劑盒對痛風(fēng)病人的診斷靈敏性高、特異性好、檢測方便，具有良好的臨床應(yīng)用價值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分子診斷技術(shù)領(lǐng)域，更具體的是涉及原發(fā)性痛風(fēng)的分子標(biāo)志物，可用于原發(fā)性痛風(fēng)的診斷。

背景技術(shù)

痛風(fēng)是人類常見自身炎癥性疾病之一，其特征是嘌呤代謝紊亂和(或者)尿酸排泄障礙使體內(nèi)尿酸水平升高，形成單鈉尿酸鹽結(jié)晶沉積于組織中，從而導(dǎo)致關(guān)節(jié)炎、軟組織腫塊(即痛風(fēng)石)、尿酸性腎病等。其與明顯的地理分布有關(guān)，一項涉及17476名研究對象的薈萃分析表明中國人群痛風(fēng)的患病率為1.1％；美國流行病學(xué)調(diào)查顯示2015年-2016年期間其痛風(fēng)總體患病率為3.9％，且總受影響人口呈逐年上升趨勢。

痛風(fēng)的發(fā)病基礎(chǔ)是高尿酸血癥，但并非所有高尿酸血癥都會進展成痛風(fēng)。實際上，高尿酸血癥患者中只有10％發(fā)生痛風(fēng)。在痛風(fēng)發(fā)作期間，血清尿酸也可能會降至正常水平。現(xiàn)階段痛風(fēng)的診斷大多依靠臨床表現(xiàn)、血尿常規(guī)、血尿酸測定、關(guān)節(jié)超聲和關(guān)節(jié)腔穿刺檢查等，它們雖各有優(yōu)勢，但或為有創(chuàng)檢查，或敏感性或特異性不足，或技術(shù)要求比較高，需要豐富的臨床經(jīng)驗，不能滿足臨床需要。同時，由于痛風(fēng)不僅會引起關(guān)節(jié)炎癥，長期的痛風(fēng)還可成為高血壓、高血脂、心血管疾病及腦血管疾病的重要危險因素，因此，尋找敏感性、特異性高的標(biāo)志物用于痛風(fēng)診斷及早期治療是十分必要的。

環(huán)狀RNA(circle?RNA，circRNA)是一類封閉環(huán)狀的非編碼RNA，其主要的生物學(xué)功能是通過與微小RNA(microRNA，miRNA)結(jié)合，發(fā)揮“海綿”作用，此外，還可調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)結(jié)合、參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控和編碼蛋白多肽，參與多種疾病的發(fā)生。在已有的研究中發(fā)現(xiàn)circRNA在疾病和正常人群間存在差異表達，并且有成為生物標(biāo)志物的潛能。發(fā)明人通過微陣列芯片技術(shù)對痛風(fēng)測序數(shù)據(jù)進行進一步挖掘和整合分析，用生物信息學(xué)方法構(gòu)建circRNA-miRNA相互作用的生物信息調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，并對circRNA的來源基因分別進行GO功能分析和Pathway分析，尋找參與調(diào)控痛風(fēng)的關(guān)鍵分子，發(fā)現(xiàn)了hsa_circ_0008961。

發(fā)明內(nèi)容

用于原發(fā)性痛風(fēng)診斷的circRNA標(biāo)志物在制備原發(fā)性痛風(fēng)診斷試劑盒中的應(yīng)用。

所述的circRNA標(biāo)志物為SEQ?ID?NO：1所示的hsa_circ_0008961。

采用熒光定量PCR技術(shù)檢測樣本中hsa_circ_0008961的表達水平。

所述hsa_circ_0008961在原發(fā)性痛風(fēng)患者的外周血中表達量升高。

所述的circRNA標(biāo)志物的引物對為針對hsa_circ_0008961的特異性引物。

所述的針對hsa_circ_0008961的特異性引物，包括如SEQ?ID?NO：2所示的上游引物，如SEQ?ID?NO：3所示的下游引物。

所述試劑盒還包括反轉(zhuǎn)錄和PCR反應(yīng)所需的酶和/或試劑。

所述試劑盒還包括逆轉(zhuǎn)錄酶、dNTP、MgC12、緩沖液、熒光染料、去核酸酶水、探針和/或Taq酶。

樣本為外周血。