[發(fā)明專利]一種第四代CAR-T細胞及其應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011521237.6
• 申請日: 2020-12-21
• 公開（公告）號: CN112608902A
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發(fā)明（設計）人: 湯朝陽;秦樂;吳迪;馮世忠;馮嘉昆;楊樂旋;其他發(fā)明人請求不公開姓名
• 申請（專利權）人: 廣東昭泰體內生物醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/867;A61K39/00;A61K38/20;A61K38/19;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

本發(fā)明提供了一種第四代CAR?T細胞及其應用，所述第四代CAR?T細胞表達特異性結合抗原的嵌合抗原受體、復合型IL?6和CCL19；所述復合型IL?6和CCL19為NFAT調控型過表達。本發(fā)明采用NFAT調控啟動子調控T細胞對復合型IL?6和CCL19的表達，在識別腫瘤抗原后表達分泌HIL?6和CCL19，顯著提高了CAR?T細胞的增殖能力和抗腫瘤效果，同時規(guī)避了全身性或者局部的炎癥反應，降低了CAR?T的副作用。

技術領域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術領域，涉及一種第四代CAR-T細胞及其應用，尤其涉及一種條件性過表達復合型IL-6和CCL19的第四代CAR-T細胞及其應用。

背景技術

隨著腫瘤免疫學理論和臨床技術的發(fā)展，嵌合抗原受體T細胞療法(Chimericantigen receptor T-cell immunotherapy，CAR-T)成為最有發(fā)展前景的腫瘤免疫療法之一。目前，CAR-T細胞療法已經廣泛應用于治療B細胞惡性腫瘤，靶向CD19的CAR-T細胞是CAR-T療法治療B細胞惡性腫瘤的先驅，為治療B細胞惡性腫瘤提供了有效方案。

但是，CAR-T細胞療法仍然存在多種問題。在白血病治療方面，CAR-T細胞療法存在復發(fā)率高的問題，促進CAR-T細胞的維持和記憶性T細胞的形成可能是解決該問題的技術突破口；此外，抗CD19的CAR-T細胞的臨床治療研究結果顯示，患者對CAR-T細胞治療的響應率與細胞因子釋放綜合征(CRS)的發(fā)生存在一定的正相關關系，而CRS又可能導致CAR-T細胞相關的腦病綜合征(CRES)等副作用，嚴重限制了CAR-T細胞的臨床應用；而在實體瘤治療方面，CAR-T細胞療效差，目前尚未報道相關的臨床研究突破。

發(fā)明內容

針對現(xiàn)有技術的不足和實際需求，本發(fā)明提供了一種第四代CAR-T細胞及其應用，通過條件性過表達復合型IL-6和CCL19，不僅提高了CAR-T抗腫瘤作用，而且降低了其在治療過程中的副作用。

為達此目的，本發(fā)明采用以下技術方案：

第一方面，本發(fā)明提供了一種第四代CAR-T細胞，所述第四代CAR-T細胞表達特異性結合抗原的嵌合抗原受體、復合型IL-6和CCL19；

所述復合型IL-6和CCL19為NFAT調控型過表達。

本發(fā)明中，采用NFAT調控啟動子調控T細胞對復合型IL-6和CCL19的表達，當CAR-T細胞處于靜息狀態(tài)時，復合型IL-6和CCL19不表達，當CAR-T細胞識別腫瘤抗原被激活后，NFAT調控啟動子5×NFAT-RE-minP啟動對復合型IL-6和CCL19的轉錄和翻譯，復合型IL-6和CCL19表達，復合型IL-6刺激CAR-T細胞增殖、記憶分化、增強殺傷效果，CCL19將外周血免疫細胞最大程度被招募到腫瘤內部，兩者相互配合共同實現(xiàn)對腫瘤的靶向促凋亡作用。

優(yōu)選地，所述復合型IL-6為IL-6和IL-6Rα的復合物，所述復合型IL-6(HIL-6)包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；

SEQ ID NO:1：