[發明專利]一種利用熒光顯微鏡觀察植物葉表皮毛被的方法

有效

• 申請號: 202011514828.0
• 申請日: 2020-12-21
• 公開（公告）號: CN112525876B
• 公開（公告）日: 2022-11-01
• 發明（設計）人: 劉孟奇;羅曉;劉春朝;練從龍;王海春;徐璐;陳隨清
• 申請（專利權）人: 河南中醫藥大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N1/28
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

1.一種利用熒光顯微鏡觀察艾、野菊植物葉表皮毛被的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）、剪取葉片：從植株上剪下成熟的葉片，在葉片中脈中段兩側剪取無粗葉脈的5-10mm²葉片；

（2）、甲醇固定：將剪取的葉片，置于甲醇中固定3—6h；

（3）、乙醇處理：將葉片轉移至體積濃度95%的乙醇中浸泡6—12h，以除去葉綠素；

（4）、小檗堿處理：從體積濃度95%的乙醇中取出處理好的葉片，在體積濃度0.1%—0.5%的小檗堿中浸泡5—15min；

（5）、香草醛-濃鹽酸處理：將葉片從小檗堿中取出，轉移至香草醛-濃鹽酸液中處理1—5min；所述的香草醛-濃鹽酸液是，香草醛1-5g加濃鹽酸至100mL制成，濃鹽酸質量濃度為36%—38%；

（6）、漂洗：將葉片從香草醛-濃鹽酸液中取出，用水漂洗1—2min；

（7）、封片：將漂洗好的葉片轉移至載玻片上，蓋上蓋玻片，輕輕壓平，用落射熒光顯微鏡觀察腺毛和非腺毛的類型和分布，并攝像。

2.根據權利要求1所述的利用熒光顯微鏡觀察艾、野菊植物葉表皮毛被的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）、剪取葉片：從植株上剪下成熟的葉片，在葉片中脈中段兩側剪取無粗葉脈的8mm²葉片；

（2）、甲醇固定：將剪取的葉片，室溫置于甲醇中固定4h；

（3）、乙醇處理：用鑷子將葉片轉移至體積濃度95%的乙醇中室溫浸泡9h，以除去葉綠素；

（4）、小檗堿處理：用鑷子從體積濃度95%的乙醇中取出處理好的葉片，在體積濃度0.3%的小檗堿中室溫浸泡10min；

（5）、香草醛-濃鹽酸處理：用鑷子將葉片從小檗堿中取出，轉移至香草醛-濃鹽酸液中室溫處理3min；所述的香草醛-濃鹽酸液是，香草醛3g加濃鹽酸至100mL制成，濃鹽酸質量濃度為37%；

（6）、漂洗：用鑷子將葉片從香草醛-濃鹽酸液中取出，用水漂洗2min；

（7）、封片：用鑷子將漂洗好的葉片轉移至載玻片上，蓋上蓋玻片，輕輕壓平，用落射熒光顯微鏡觀察腺毛和非腺毛的類型和分布，并攝像。

3.根據權利要求1所述的利用熒光顯微鏡觀察艾、野菊植物葉表皮毛被的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）、剪取葉片：從植株上剪下成熟的葉片，在葉片中脈中段兩側剪取無粗葉脈的6mm²葉片；

（2）、甲醇固定：將剪取的葉片，室溫置于甲醇中固定5h；

（3）、乙醇處理：用鑷子將葉片轉移至體積濃度95%的乙醇中室溫浸泡7h，以除去葉綠素；

（4）、小檗堿處理：用鑷子從體積濃度95%的乙醇中取出處理好的葉片，在體積濃度0.4%的小檗堿中室溫浸泡6min；

（5）、香草醛-濃鹽酸處理：用鑷子將葉片從小檗堿中取出，轉移至香草醛-濃鹽酸液中室溫處理4min，所述的香草醛-濃鹽酸液是，香草醛2g加濃鹽酸至100mL制成，濃鹽酸質量濃度為38%；

（6）、漂洗：用鑷子將葉片從香草醛-濃鹽酸液中取出，用水漂洗2min；

（7）、封片：用鑷子將漂洗好的葉片轉移至載玻片上，蓋上蓋玻片，輕輕壓平，用落射熒光顯微鏡觀察腺毛和非腺毛的類型和分布，并攝像。

4.根據權利要求1所述的利用熒光顯微鏡觀察艾、野菊植物葉表皮毛被的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）、剪取葉片：從植株上剪下成熟的葉片，在葉片中脈中段兩側剪取無粗葉脈的9mm²葉片；

（2）、甲醇固定：將剪取的葉片，室溫置于甲醇中固定3.5h；

（3）、乙醇處理：用鑷子將葉片轉移至體積濃度95%的乙醇中室溫浸泡11h，以除去葉綠素；

（4）、小檗堿處理：用鑷子從體積濃度95%的乙醇中取出處理好的葉片，在體積濃度0.2%的小檗堿中室溫浸泡14min；

（5）、香草醛-濃鹽酸處理：用鑷子將葉片從小檗堿中取出，轉移至香草醛-濃鹽酸液中室溫處理2min；所述的香草醛-濃鹽酸液是，香草醛4g加濃鹽酸至100mL制成，濃鹽酸質量濃度為36%；

（6）、漂洗：用鑷子將葉片從香草醛-濃鹽酸液中取出，用水漂洗1min；

（7）、封片：用鑷子將漂洗好的葉片轉移至載玻片上，蓋上蓋玻片，輕輕壓平，用落射熒光顯微鏡觀察腺毛和非腺毛的類型和分布，并攝像。