[發明專利]一種多抗原蛋白組合應用于肺結核的鑒別與診斷

有效

• 申請號: 202011512557.5
• 申請日: 2020-12-20
• 公開（公告）號: CN112684183B
• 公開（公告）日: 2022-09-02
• 發明（設計）人: 金奇;鄭建華;劉立國;鄧佳珩
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院病原生物學研究所
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/573
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 王為

本發明涉及5個抗原蛋白應用于活動性結核病的鑒別與診斷，并提供一種診斷試劑，本發明特別涉及一種新的結核病診斷方法，即采用5個抗原蛋白P22352，Q9P121，P15151，Q13291，Q8NDA2作為生物標志物，檢測尿液中5個抗原蛋白的含量，并以特定的含量的量值作為診斷指標，在該正常值范圍內則為陰性。任意3個或以上抗原蛋白的濃度超過或低于該正常值范圍，判斷為陽性結果。

技術領域

本發明涉及一種診斷試劑，特別涉及一種多抗原蛋白應用于活動性結核病的鑒別與診斷。

背景技術

結核病是危害人類健康的主要傳染病之一，是當今世界上成年人傳染病中的主要殺手，已對國際公共衛生構成嚴峻挑戰。我國是全球結核病高負擔國家之一，結核病疫情呈“三高一低”，即患病率高、死亡率高、耐藥率高、年遞降率低，隨著艾滋病合并感染、耐藥結核以及流動人口增多等情況的出現，防控形勢非常嚴峻。自結核分枝桿菌發現以來，由于菌體的細胞壁較厚、脂肪酸含量較高、胞內寄生等特點，結核病的早期和快速診斷一直以來靈敏度較低，沒有突破性的進展。目前多種診斷手段的聯合應用(痰涂片、痰培養和分子診斷技術)僅僅可以診斷出50％左右的結核病患者，仍然有近一半的臨床病原學陰性或者痰菌陰性的結核病人無法得到科學、合理和快速的診斷，甚至貽誤病情、導致耐藥。因此，快速準確診斷出結核病人群，以便后續采取有效的治療干預措施，降低感染者的發病風險，將是降低結核病發病率的最直接手段。

鑒于很多疾病都在尿液的化學代謝物中有所反映，在尿液中找出疾病的一種或多種特異性的生物標識物，將有助于研究人員利用少量尿液或甚至一滴尿液檢測許多疾病。尿液具有收集簡單、取材方便、來源豐富、非侵入性等特點，尿液蛋白的種類和數量的變化攜帶有許多疾病的發生、發展及預后的各種信息，因此在疾病的診斷、監測、預后等方面很有價值，有廣闊的應用前景。傳統的痰涂片檢查雖然是診斷肺結核的金標準，簡便易行，結果可信度也較高，但陽性率較低，臨床上僅有約20-30％的肺結核患者痰涂片檢測陽性。采用痰中分枝桿菌培養的方法，耗時較長，經常需要1-3周甚至4-6周，不能滿足快速診斷的需要。目前采用的分子診斷技術，例如GeneXpert MTB/RIF方法，雖然靈敏度較高，?？梢栽谳^短時間內(約2小時)直接從病人新鮮痰液或凍存痰液中檢測是否存在結核分枝桿菌及對利福平的耐藥性，但整個過程需要在密閉環境中進行，需要專業的 GeneXpert檢測儀器和標本收集盒，并且需要專業人員來操作，成本高昂，不利于大規模地推廣。即便目前多種病原學診斷聯合應用(痰涂片、痰培養和分子診斷技術)，也僅僅只能診斷出50％左右的結核病患者，仍然有近一半的臨床病原學陰性或者痰菌陰性的結核病人無法得到科學、合理和快速的診斷。近年來以細胞免疫反應為基礎的血液中γ干擾素釋放試驗，如T-SPOT和QuantiFERON-TB Gold檢測獲得了較快的發展被并廣泛應用，但其診斷的敏感性也有待提高，經常會出現無法判定檢測結果的情況，而且無法區分活動性結核病和潛伏性結核感染，并且其成本較為高昂、具有侵入創傷性。因此，在目前的情況下，急需開發適合我國國情的具有自主知識產權、成本低廉、簡便快捷的無創診斷產品。

本發明在現有技術的基礎上，采用生物標志物方法，意外發現新的生物標志物，即5個抗原蛋白(P 22352,Q9P121,P15151,Q13291和Q8NDA2)，本發明發現通過檢測這5個抗原蛋白中的任意3個或以上的組合的含量，可以診斷肺結核且能達到82.7％的診斷靈敏度，能很好地區分結核病人和潛伏感染人群。為此，本發明提供一種新的結核病診斷方法，即采用5個抗原蛋白及其組合作為生物標志物，檢測尿液中5個抗原蛋白的含量，并以特定的含量的量值作為診斷指標， 5個蛋白中任意3個或以上抗原蛋白的濃度低于或超過該限度，判斷為陽性結果。

發明內容

本發明的目的在于提供5個抗原組合在診斷結核病中的應用。本發明所述的抗原組合能夠作為診斷結核病或者檢測結核分枝桿菌潛伏感染的診斷標識，并且其具有良好的敏感性和特異性。

本發明所述的五個抗原蛋白皆為人體尿液中的蛋白，分別名稱為：P22352，Q9P121，P15151，Q13291，Q8NDA2。