[發明專利]一種化學修飾脂肪酶的制備方法、脂肪酶及合成L-丙交酯的應用

有效

• 申請號: 202011508304.0
• 申請日: 2020-12-18
• 公開（公告）號: CN112695020B
• 公開（公告）日: 2023-01-31
• 發明（設計）人: 李榮杰;徐斌;汪本助;王舒
• 申請（專利權）人: 安徽豐原生物技術股份有限公司
• 主分類號: C12N9/20
• 分類號: C12N9/20;C07K1/107;C12P17/06
• 代理公司: 北京睿陽聯合知識產權代理有限公司 11758
• 代理人: 楊金賢;張穎

1.一種化學修飾脂肪酶的制備方法，其特征在于，所述化學修飾脂肪酶通過將南極假絲酵母脂肪酶B用含有環氧油酸異丙酯的溶劑處理制得；

所述制備方法包括步驟：將南極假絲酵母脂肪酶B加入緩沖液，之后與含環氧油酸異丙酯的溶劑混合；所述溶劑為石油醚，所述緩沖液為磷酸鈉緩沖液；

將南極假絲酵母脂肪酶B用含有環氧油酸異丙酯的溶劑處理之后，還包括用固相化載體吸附處理的步驟，所述固相化載體為大孔樹脂。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述含環氧油酸異丙酯的溶劑中環氧油酸異丙酯的濃度為體積百分比0.1～0.5％。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述含環氧油酸異丙酯的溶劑中環氧油酸異丙酯的濃度為體積百分比0.1～0.3％。

4.根據權利要求1～3任一項所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

(1)將南極假絲酵母脂肪酶B加入磷酸鈉緩沖液，之后與環氧油酸異丙酯的石油醚溶液混合均勻；

(2)向步驟(1)得到的混合體系中加入固相化載體大孔樹脂，振蕩吸附后分離出固體和上清液，所述固體清洗后再真空干燥，得到化學修飾固定化脂肪酶產品。

5.一種化學修飾脂肪酶，其特征在于，所述化學修飾的脂肪酶為環氧油酸異丙酯修飾的南極假絲酵母脂肪酶B酶。

6.根據權利要求5所述的化學修飾脂肪酶，其特征在于，所述化學修飾的脂肪酶為化學修飾固定化脂肪酶。

7.一種采用權利要求1～4中任一項所述的制備方法制得的脂肪酶。

8.權利要求5-7中任一項所述的化學修飾脂肪酶在催化合成丙交酯中的應用。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述的化學修飾脂肪酶在催化合成L-丙交酯中的應用。

10.一種丙交酯的合成方法，其特征在于，采用權利要求5-7任一項所述的化學修飾脂肪酶催化合成制得。

11.根據權利要求10所述的合成方法，其特征在于，所述丙交酯以乳酸為原料酶催化制得。

12.根據權利要求11所述的合成方法，其特征在于，所述丙交酯以L-乳酸為原料酶催化制得。

13.根據權利要求10所述的合成方法，其特征在于，包括以下步驟：

將化學修飾的脂肪酶與L-乳酸、分子篩、溶劑混合反應；

之后過濾，收集反應液，濃縮除去溶劑；

濃縮得到的液體在真空條件下蒸餾，收集130±5℃溫度的餾分，然后冷卻結晶，得到L-丙交酯。

14.根據權利要求13所述的合成方法，其特征在于，所述化學修飾脂肪酶與L-乳酸的質量比為1：(15～25)；所述分子篩為5A分子篩；所述溶劑為石油醚；反應溫度為20～35℃。

15.根據權利要求14所述的合成方法，其特征在于，所述化學修飾脂肪酶與L-乳酸的質量比為1：(15～20)。

16.根據權利要求15所述的合成方法，其特征在于，所述化學修飾脂肪酶與L-乳酸的質量比為1：18。

17.根據權利要求14所述的合成方法，其特征在于，所述反應溫度為20～30℃。