[發(fā)明專利]一種轉(zhuǎn)基因抗蟲優(yōu)質(zhì)高衣分棉花新品系的培育方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011506486.8
• 申請日: 2020-12-18
• 公開（公告）號: CN112655545A
• 公開（公告）日: 2021-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鐘文娟;牟方生;陳正杰;陳四維;周永航;戢沛城;楊澤湖;蔣理;石盛佳;宛永璐;毛正軒;王小強(qiáng)
• 申請（專利權(quán)）人: 四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物育種栽培研究所
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H1/04
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 瞿曉晶

1.一種轉(zhuǎn)基因抗蟲優(yōu)質(zhì)高衣分棉花新品系的培育方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)以轉(zhuǎn)基因抗蟲優(yōu)質(zhì)棉花品系為母本，以轉(zhuǎn)基因高衣分品系為父本進(jìn)行雜交，得轉(zhuǎn)基因抗蟲雜交組合F₁；

(2)以所述轉(zhuǎn)基因抗蟲雜交組合F₁為母本，以所述轉(zhuǎn)基因抗蟲優(yōu)質(zhì)品系為父本進(jìn)行雜交，得回交一代BC₁F₁；

(3)以所述回交后代中具有轉(zhuǎn)基因高衣分基因的植株為母本，以所述轉(zhuǎn)基因抗蟲優(yōu)質(zhì)棉花品系為輪回親本，進(jìn)行回交，連續(xù)回交五代，得回交六代BC₆F₁；

(4)對所述回交六代BC₆F₁中具有轉(zhuǎn)基因高衣分基因的植株進(jìn)行自交，單株收獲，得BC₆F₂；

(5)篩選所述BC₆F₂中所有植株都抗蟲的抗蟲株行中具有轉(zhuǎn)基因高衣分基因的植株進(jìn)行自交，單株收獲，得BC₆F₃；

(6)篩選所述BC₆F₃中所有植株都抗蟲且具有轉(zhuǎn)基因高衣分基因的株行進(jìn)行自交繁殖，株行收獲評價(jià)篩選，得轉(zhuǎn)基因抗蟲優(yōu)質(zhì)高衣分棉花新品系。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述培育方法，其特征在于，步驟(1)中所述母本包括金陸長1號；所述父本包括IF1-1。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述選育方法，其特征在于，所述轉(zhuǎn)基因高衣分材料IF1-1含有FBP7::iaaM基因。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述培育方法，其特征在于，所述高衣分基因FBP7::iaaM的PCR鑒定引物包括IF-up、IF-dn1和IF-dn2；且所述IF-up的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述IF-dn1的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，IF-dn2的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述培育方法，其特征在于，所述PCR鑒定的體系以25μL計(jì)，包括：5×PrimeSTAR緩沖液5μL、dNTP 2μL、上游引物和下游引物各1μL、棉花gDNA 10～200ng、PrimeSTAR DNAPolymerase 0.5U和余量的水。

6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述培育方法，其特征在于，所述PCR鑒定的程序包括：98℃變性10sec，56℃退火5sec、72℃延伸60sec，32循環(huán)。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述培育方法，其特征在于，步驟(1)～步驟(5)中抗蟲性的篩選方法，包括：在棉苗5～7葉期，以質(zhì)量百分濃度為0.8％的硫酸卡拉霉素溶液涂抹才展開的葉片，若葉片不變色則鑒定該植株具有抗蟲性，若變色則不具有抗蟲性。