[發明專利]一種水中病毒的富集及檢測方法有效
| 申請號： | 202011498998.4 | 申請日： | 2020-12-18 |
| 公開（公告）號： | CN112626167B | 公開（公告）日： | 2022-10-25 |
| 發明（設計）人： | 楊敏;于麗娜;田哲;張昱 | 申請（專利權）人： | 中國科學院生態環境研究中心 |
| 主分類號： | C12Q1/24 | 分類號： | C12Q1/24;C12Q1/70;C12Q1/6851;C12Q1/06;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京元本知識產權代理事務所(普通合伙) 11308 | 代理人： | 侯妮娜 |
| 地址： | 100085*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 水中 病毒 富集 檢測 方法 | ||
1.一種水中病毒的檢測方法，其特征是，包括如下順序進行的步驟：
1）測定或調節水的pH，在水的pH為4-9的條件下，向水中加入絮凝劑，接著再加入pH調節劑，調整水的pH值為4-9，絮凝劑對水體中的病毒進行絮凝處理，獲得絮凝混合液，其中所述絮凝劑選擇鋁鹽絮凝劑；
2）對絮凝混合液進行過濾處理，并將過濾后的固體重新懸浮于緩沖溶液中，制得重懸混合液，其中所述的緩沖溶液選擇PBS緩沖溶液、Tris-HCL緩沖液或HEPES緩沖液；
3）對重懸混合液進行研磨處理，制得研磨液，其中研磨處理的研磨頻率為20-30Hz；研磨時間為3-15min；
4）對研磨液進行核酸提取，并進行核酸定量PCR測定。
2.如權利要求1所述的方法，其特征是，所述水選自農村或城市生活污水、醫院污水、畜禽養殖廠污水、河、湖自然水體或飲用水。
3.如權利要求1所述的方法，其特征是，所述水選自屠宰污水或農貿市場污水。
4.如權利要求1-3任一所述的方法，其特征是，步驟1）中所述絮凝劑為氯化鋁、硫酸鋁、聚合氯化鋁或聚合硫酸鋁鐵。
5.如權利要求1-3任一所述的方法，其特征是，步驟3）中所述研磨處理的研磨時間為5-15min。
6.如權利要求1-3任一所述的方法，其特征是，步驟3）中所述研磨處理的研磨時間為5min。
7.如權利要求1-3任一所述的方法，其特征是，步驟4）中所述核酸提取方法為酚/氯仿抽提法、離心柱法或磁珠法。
8.如權利要求1-3任一所述的方法，其特征是，步驟4）中所述核酸提取方法為磁珠法。
9.如權利要求1-3任一所述的方法，其特征是，步驟4）中所述定量PCR測定選擇逆轉錄定量PCR或數字PCR進行。
10.如權利要求1-3任一所述的方法，其特征是，步驟1）中所述調節水的pH值為6。
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