[發明專利]高持久性的驅蚊生物制劑及制備方法

在審

• 申請號: 202011496149.5
• 申請日: 2020-12-17
• 公開（公告）號: CN112680374A
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發明（設計）人: 雍思龍;林詩琪;張虎;陳衍學;李嬋;劉暢
• 申請（專利權）人: 湖北綠天地生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N25/12;A01N63/23;A01P17/00;C12R1/07
• 代理公司: 重慶百潤洪知識產權代理有限公司 50219
• 代理人: 陳萬江

本發明涉及生物滅蚊農藥技術領域，特別涉及高持久性的驅蚊生物制劑及制備方法；蘇云金桿菌以色列亞種原菌在斜面種子培養基中進行種子培養，隨后將種子接入種子罐的發酵培養基中進行種子培養，所述斜面種子培養基包括牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和去離子水，所述牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和去離子水的質量比為0.5～1：1～2：0.5～1：0.5～1：3～4：400～500，所述發酵培養基由以下重量百分比的各原料制得：玉米淀粉2～2.5％、蛋白胨0.2～0.4％、酵母粉0.1～0.2％、豆粕粉2.2～3.0％、玉米漿1.0～1.5％、磷酸二氫鉀0.05～0.1％、硫酸鎂0.01～0.03％、氯化鈣0.1～0.2％、硫酸錳0.003～0.005％和去離子水92.065～94.337％。本發明的驅蚊生物制劑的持續時間長，產品穩定性高。

技術領域

本發明涉及生物滅蚊農藥技術領域，特別涉及高持久性的驅蚊生物制劑及制備方法。

背景技術

蚊子是傳播人類疾病的重要媒介昆蟲之一。滅蚊劑的發展經歷了礦物油、植物粉和化學殺蟲劑到微生物滅蚊劑等階段。幼蟲時期是防治蚊蟲的關鍵時期。蘇云金芽孢桿菌以色列亞種(Bacillus thuring iensis subsp.israelensis，簡稱Bti)以其對蚊科幼蟲高毒，且高效安全、易于分解、低殘留、與環境相容的特性，成為被廣泛關注的新的滅蚊劑的代表。Bti是Goldberg和Margalit于1977年發現的一種對蚊科幼齡害蟲具有高度毒力的病原細菌。自發現以來，人們利用Bti制劑為控制蚊媒病的傳播做出了大量工作。然而，現有劑型持效期短，限制了Bti的更大規模的應用，通過改進制劑的持效性可以減少使用次數和防治成本，因此，研究開發有緩釋作用持效期長的Bti劑型具有重要意義。

為此，提出高持久性的驅蚊生物制劑及制備方法。

發明內容

本發明的目的在于提供高持久性的驅蚊生物制劑及制備方法，該驅蚊生物制劑的持續時間長，產品穩定性高。

為了實現上述目的，本發明的技術方案如下：

高持久性的驅蚊生物制劑，蘇云金桿菌以色列亞種原菌在斜面種子培養基中進行種子培養，隨后將種子接入種子罐的發酵培養基中進行種子培養，所述斜面種子培養基包括牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和去離子水，所述牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和去離子水的質量比為0.5～1：1～2：0.5～1：0.5～1：3～4：400～500，所述發酵培養基由以下重量百分比的各原料制得：玉米淀粉2～2.5％、蛋白胨0.2～0.4％、酵母粉0.1～0.2％、豆粕粉2.2～3.0％、玉米漿1.0～1.5％、磷酸二氫鉀0.05～0.1％、硫酸鎂0.01～0.03％、氯化鈣0.1～0.2％、硫酸錳0.003～0.005％和去離子水92.065～94.337％，其中，所述蘇云金桿菌以色列亞種原菌的添加量為1-2支斜面種子/T，所述發酵種子的添加量為1kg/T。

具體的，所述牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和去離子水的質量比為1：2：1：1：4：500。

具體的，所述發酵培養基由以下重量百分比的各原料制得：玉米淀粉2.5％、蛋白胨0.4％、酵母粉0.2％、豆粕粉3.0％、玉米漿1.5％、磷酸二氫鉀0.1％、硫酸鎂0.03％、氯化鈣0.2％、硫酸錳0.005％和去離子水92.065％。

高持久性的驅蚊生物制劑的制備方法，包括以下步驟：

(1)發酵種子的斜面種子培養基制備，按配比稱取相應的原料組分，將牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和去離子水分別置于種子罐中，添加蘇云金桿菌以色列亞種原菌，在PH7.0～7.2以及培養溫度為32℃的條件下培養4～5d，得到種子A；

(2)發酵培養基的制備，按配比稱取相應的原料組分，將玉米淀粉、蛋白胨、酵母粉、豆粕粉、玉米漿、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣、硫酸錳和去離子水分別置于種子罐中，在PH 7.5～7.8以及121℃的條件下滅菌30min，備用，得到發酵培養基B；