[發明專利]一種基于核酸適體和金納米顆粒有效組裝對生物大分子可視化特異性檢測的方法在審
| 申請號: | 202011495128.1 | 申請日: | 2020-12-17 |
| 公開(公告)號: | CN112666156A | 公開(公告)日: | 2021-04-16 |
| 發明(設計)人: | 鄧春艷;謝云燕;許游游 | 申請(專利權)人: | 中南大學 |
| 主分類號: | G01N21/78 | 分類號: | G01N21/78 |
| 代理公司: | 長沙市融智專利事務所(普通合伙) 43114 | 代理人: | 張偉;魏娟 |
| 地址: | 410083 湖南*** | 國省代碼: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 基于 核酸 納米 顆粒 有效 組裝 生物 大分子 可視化 特異性 檢測 方法 | ||
1.一種基于核酸適體和金納米顆粒有效組裝對生物大分子可視化特異性檢測的方法,其特征在于:包括以下步驟:
1)以濃度為5~15nM納米金溶液與目標生物大分子適配體按摩爾比1:4~6共同孕育,得到適配體@AuNPs復合物溶液;
2)將適配體@AuNPs復合物溶液分別與一系列不同濃度的標準目標生物大分子溶液共同孕育后,再與濃度為40~80mM的NaCl溶液反應,且控制溶液體系pH在6~8范圍內,依據不同濃度的標準目標生物大分子溶液對應的氯化鈉溶液顯示不同顏色,建立濃度與顏色比對卡;
3)將待測標準目標生物大分子溶液替換步驟2)的標準目標生物大分子溶液進行反應后,根據氯化鈉溶液顯示的顏色在濃度與顏色比對卡確定待測目標生物大分子溶液的濃度范圍。
2.根據權利要求1所述的一種基于核酸適體和金納米顆粒有效組裝對生物大分子可視化特異性檢測的方法,其特征在于:所述納米金平均水合粒徑為20~25nm。
3.根據權利要求1或2所述的一種基于核酸適體和金納米顆粒有效組裝對生物大分子可視化特異性檢測的方法,其特征在于:納米金與目標生物大分子適配體的摩爾比例為1:5。
4.根據權利要求1所述的一種基于核酸適體和金納米顆粒有效組裝對生物大分子可視化特異性檢測的方法,其特征在于:所述目標生物大分子適配體包含30~40個堿基。
5.根據權利要求1所述的一種基于核酸適體和金納米顆粒有效組裝對生物大分子可視化特異性檢測的方法,其特征在于:所述NaCl溶液的濃度為55~65mM。
6.根據權利要求1所述的一種基于核酸適體和金納米顆粒有效組裝對生物大分子可視化特異性檢測的方法,其特征在于:所述溶液體系的pH控制在7~7.5范圍內。
7.根據權利要求1所述的一種基于核酸適體和金納米顆粒有效組裝對生物大分子可視化特異性檢測的方法,其特征在于:
目標生物大分子適配體與納米金共同孕育的時間不小于3min;
適配體@AuNPs復合物與標準目標生物大分子溶液或待測目標生物大分子溶液共同孕育的時間不小于3min;
加入NaCl溶液反應的時間不小于3min。
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