[發(fā)明專利]DNA編碼化合物庫構(gòu)建中On-DNA 4-胺基喹唑啉化合物的合成方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202011494835.9
• 申請日: 2020-12-17
• 公開（公告）號: CN112661803A
• 公開（公告）日: 2021-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 文華楠;葛蕊;曲毅;吳阿亮;安玉龍;蘇文姬;蒯樂天;楊洪芳;彭宣嘉
• 申請（專利權(quán)）人: 上海藥明康德新藥開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07H21/04
• 分類號: C07H21/04;C07H1/00
• 代理公司: 上海浦一知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31211
• 代理人: 鄭權(quán)

1.一種DNA編碼化合物庫構(gòu)建中本發(fā)明方法，其特征在于，將摩爾濃度為0.1～2.0mM的On-DNA胺類化合物，與10～500摩爾當(dāng)量的4-羥基喹唑啉化合物溶液、10-500摩爾當(dāng)量的有機(jī)堿試劑和10～500摩爾當(dāng)量的縮合劑溶液混合，在20～80℃下反應(yīng)1～24小時(shí)，使所述On-DNA胺基化合物與4-羥基喹唑啉化合物直接氨化反應(yīng)得到On-DNA 4-胺基喹唑啉化合物；

其中，所述On-DNA胺基化合物是指由一個(gè)含伯胺或者仲胺的化學(xué)基團(tuán)與一段DNA序列的氨基或羧基在分子水平通過共價(jià)鍵進(jìn)行連接所得到的On-DNA化合物；所述DNA是由經(jīng)人工修飾的和/或未修飾的核苷酸單體聚合得到的單鏈或雙鏈的核苷酸鏈；

所述4-羥基喹唑啉化合物是指分子結(jié)構(gòu)中含有4-羥基喹唑啉雜環(huán)結(jié)構(gòu)、分子量在1000以內(nèi)、且不含有其它能與伯胺或者仲胺直接發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的官能團(tuán)的化合物。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述On-DNA胺基化合物選自以下結(jié)構(gòu)：

其中R₁為直接連接DNA部分的官能團(tuán)，R1是與DNA上的官能團(tuán)互補(bǔ)反應(yīng)的官能團(tuán)，選自氨基、羧基、醛基、芳鹵中的任意一種；R₁直接與芳香環(huán)或烷基相連，或者間隔多個(gè)化學(xué)鍵與芳香環(huán)或烷基相連；R₂獨(dú)立地選自氫、芳基、烷基、鹵素、氨基、硝基、氰基、羥基、巰基、芳基甲酮、烷基甲酮、C₁-C₁₂烷基、C₁-C₆烯烴基、C₁-C₆炔烴基、C₃-C₈環(huán)烷基、C₁-C₆烷基氧基、C₁-C₆烷基氨基中的任意一種，R₂在環(huán)上的數(shù)目為一個(gè)或多個(gè)。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述On-DNA胺基化合物溶于水溶液后的摩爾濃度是0.1～2.0mM；優(yōu)選地，所述On-DNA胺基化合物水溶液的摩爾濃度為1.0mM。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述溶液是含乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亞砜、甲醇、乙醇、叔丁醇、異丙醇、四氫呋喃、無機(jī)鹽緩沖液、有機(jī)酸緩沖液、有機(jī)堿緩沖液中的任意一種或幾種的含水的混合溶劑；優(yōu)選地，所述On-DNA胺類化合物溶于水。

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述4-羥基喹唑啉的摩爾當(dāng)量是10～500當(dāng)量；優(yōu)選的，所述小分子4-羥基喹唑啉的摩爾當(dāng)量是200當(dāng)量。

6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述有機(jī)堿試劑是N,N-二異丙基乙胺(DIPEA)、1,8二氮雜二環(huán)十一碳-7-烯(DBU)、三乙烯二胺、三乙胺、三甲胺、吡啶、哌啶；優(yōu)選地，所述有機(jī)堿試劑是1,8二氮雜二環(huán)十一碳-7-烯(DBU)。

7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述有機(jī)堿試劑的摩爾當(dāng)量是10～500當(dāng)量；優(yōu)選的，所述有機(jī)堿試劑的摩爾當(dāng)量是200當(dāng)量。

8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述縮合劑是2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯、六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三吡咯烷基磷、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸鹽、(3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-氧基)三-1-吡咯烷基鏻六氟磷酸鹽、三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽，6-氯苯并三氮唑-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯；優(yōu)選地，所述縮合劑是苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸鹽。

9.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述縮合劑的摩爾當(dāng)量是10～500當(dāng)量；優(yōu)選的，所述小分子胺的摩爾當(dāng)量是200當(dāng)量。