[發(fā)明專利]一種利用尿液中脫落細(xì)胞篩查前列腺疾病的基因芯片

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• 申請日: 2020-12-17
• 公開（公告）號: CN114645090A
• 公開（公告）日: 2022-06-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 邢念增;華子昂;劉寶全;朱美瑛;萬君興;竹添;李娜;張建
• 申請（專利權(quán)）人: 北京華牛世紀(jì)生物技術(shù)研究院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了一種利用尿液中脫落細(xì)胞篩查前列腺疾病的基因芯片，以尿液中脫落細(xì)胞中RNA為基礎(chǔ)通過大數(shù)據(jù)比對完成前列腺癌特異性探針設(shè)計并制作基因芯片，通過尿液中脫落細(xì)胞的RNA與基因芯片的配合完成前列腺疾病的篩查。以尿液中脫落細(xì)胞進(jìn)行基因芯片檢測可以避免各種穿刺取樣的創(chuàng)傷風(fēng)險與感染危險，并且細(xì)胞類型以前列腺上皮細(xì)胞為主，更能反應(yīng)前列腺疾病的基因突變。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及大健康檢測領(lǐng)域，特別是一種利用尿液中脫落細(xì)胞篩查前列腺疾病的基因芯片。

背景技術(shù)

前列腺是男性生殖系統(tǒng)的附屬腺，為不成對的實質(zhì)性腺體，位于膀胱與尿生殖膈之間，包繞尿道根部，其形狀和大小均似稍扁的栗子。上端寬大，下端尖細(xì)，體的后面較平坦，貼近直腸，可經(jīng)直腸指診觸及。縱徑3cm，橫徑4cm，前后徑2cm，重約20g。它的大小、功能很大程度上依賴于雄激素。小兒前列腺很小，性成熟期迅速生長；老年人腺組織逐漸退化，腺內(nèi)結(jié)締組織增生形成同時造成前列腺增生并壓迫尿道引起排尿困難。前列腺的細(xì)胞增生也容易誘發(fā)前列腺腫瘤，已經(jīng)成為造成男性死亡的主要癌癥之一。

傳統(tǒng)的前列腺癌篩查需要進(jìn)行穿刺取樣，從會陰或直腸穿刺活檢。穿刺活檢不僅會造成受檢者的自己恐慌，穿刺本身也帶有一定的手術(shù)風(fēng)險與感染風(fēng)險，往往造成沒有前列腺癌早期篩查或諱疾忌醫(yī)而耽誤和錯失最佳的治療窗口，直到形成了腫瘤，已經(jīng)無法根治了才到醫(yī)院去檢測與治療，但很多都已經(jīng)不可逆轉(zhuǎn)了。

由此可見，設(shè)計一種有效的、可以隨時檢測的前列腺癌篩查技術(shù)，對于預(yù)防男性前列腺癌、對于培養(yǎng)全民健康體系特別重要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的主要目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的上述缺陷，提出一種有效的、可以隨時檢測的前列腺癌的基因芯片篩查技術(shù)，有效預(yù)防男性前列腺癌。

本發(fā)明采用如下技術(shù)方案，一種利用尿液中脫落細(xì)胞篩查前列腺疾病的基因芯片，其特征在于，包括以下步驟：

S1從尿液中收集脫落細(xì)胞，分別完成正常人與前列腺癌患者的尿液中脫落細(xì)胞收集；

S2從收集細(xì)胞中分離RNA，進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增，獲得cDNA產(chǎn)物并完成測序；

S3通過正常人的尿液中脫落細(xì)胞cDNA序列、前列腺癌患者尿液中脫落細(xì)胞cDNA序列和大數(shù)據(jù)中多種數(shù)據(jù)庫序列的比對，確定差異基因及相關(guān)的探針；

S4將化學(xué)法合成的特異性探針用點樣儀轉(zhuǎn)移并固定到基片上制得利用尿液中脫落細(xì)胞篩查前列腺疾病的基因芯片。

優(yōu)選的，以前列腺癌患者的尿液中脫落細(xì)胞特異表達(dá)的前列腺癌相關(guān)基因設(shè)計探針和制作基因芯片。

由上述對本發(fā)明的描述可知，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

本發(fā)明以尿液中脫落細(xì)胞進(jìn)行前列腺癌早期篩查，不需要做手術(shù)取樣，不會造成患者的心理恐慌；直接收集尿液取樣，可以隨時取樣進(jìn)行篩查檢測。

使用直接的臨床數(shù)據(jù)與大數(shù)據(jù)配合完成前列腺癌早期篩查用基因芯片的探針設(shè)計，消除了國外人群遺傳背景差異造成的干擾，有效提高前列腺癌癌變早期檢出準(zhǔn)確率。

本發(fā)明實用性強(qiáng)，更易于普及，可以隨時進(jìn)行前列腺癌癌變篩查。

具體實施方式

以下通過具體實施方式對本發(fā)明作進(jìn)一步的描述。

一種利用尿液中脫落細(xì)胞篩查前列腺疾病的基因芯片，其特征在于，包括以下步驟：

（1）分別完成正常人與前列腺癌患者的尿液中脫落細(xì)胞收集；

（2）從收集的尿液中脫落細(xì)胞中分離獲得RNA，進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增，獲得cDNA產(chǎn)物并完成測序；

（3）通過正常人的尿液中脫落細(xì)胞cDNA序列、前列腺癌患者尿液中脫落細(xì)胞cDNA序列和大數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)庫中多種數(shù)據(jù)庫序列進(jìn)行比對分析，確定在前列腺癌患者尿液中的脫落細(xì)胞里特異表達(dá)的基因及其相應(yīng)的檢測探針序列；