[發明專利]檢測藥物對核酸代謝產物的吸附效率的方法及其應用

在審

• 申請號: 202011488354.7
• 申請日: 2020-12-16
• 公開（公告）號: CN114636761A
• 公開（公告）日: 2022-06-17
• 發明（設計）人: 李彤彤;梁櫻;郭麗娟;劉燕鳴
• 申請（專利權）人: 中美華世通生物醫藥科技（武漢）股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/86;G01N30/88
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 周慧云

1.一種檢測藥物對核酸代謝產物的吸附效率的方法，其特征在于，包括：

將含有核酸代謝產物的緩沖液與藥物進行混合，得到供試品溶液；

對所述供試品溶液進行高效液相色譜檢測，并基于檢測結果確定所述藥物對核酸代謝產物吸附效率，

其中，所述核酸代謝產物包括選自下列至少之一：尿酸、腺嘌呤、鳥嘌呤、次黃嘌呤、腺嘌呤核苷、鳥嘌呤核苷、肌苷和5-腺苷單磷酸；

所述高效液相色譜檢測采用的流動相包括緩沖液和/或有機溶劑，所述緩沖液的pH值為3.6～4.0。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述緩沖液的pH值為4.0。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述緩沖液選自下列至少之一：磷酸鹽緩沖液、枸櫞酸緩沖液、乙酸緩沖液和甲酸緩沖液，優選為磷酸鹽緩沖液。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述有機溶劑包括乙腈。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜檢測采用梯度洗脫方式，所述梯度洗脫的條件為：

0－15分鐘時，所述緩沖液與所述有機溶劑的體積比為100％：0％；

15－20分鐘時，所述緩沖液與所述有機溶劑的體積比為(95％～100％)：(0％～5％)；

20－40分鐘時，所述緩沖液與所述有機溶劑的體積比為95％：5％；

40－41分鐘時，所述緩沖液與所述有機溶劑的體積比為(95％～100％)：(0％～5％)；

41－60分鐘時，所述緩沖鹽與所述有機溶劑的體積比為100％：0％；

優選地，所述梯度洗脫的條件為：

0－15分鐘時，所述緩沖液與所述有機溶劑的體積比為100％：0％；

15－20分鐘時，所述緩沖液與所述有機溶劑的體積比為100％：0％；

20－40分鐘時，所述緩沖液與所述有機溶劑的體積比為95％：5％；

40－41分鐘時，所述緩沖液與所述有機溶劑的體積比為95％：5％；

41－60分鐘時，所述緩沖液與所述有機溶劑的體積比為100％：0％；

任選地，所述流動相的流速為0.2mL/min-1.0mL/min，優選為0.6mL/min。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述含有核酸代謝產物的緩沖液中含有緩沖試劑，所述緩沖試劑包括選自下列至少之一：

氫氧化鈉、磷酸鹽、2-(二乙醇氨基)乙磺酸、氨基丁三醇·鹽酸、枸櫞酸鹽和碳酸鹽；

優選為磷酸二氫鉀。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述緩沖試劑的pH為6.0～8.0，優選為6.5～7.0。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述混合是在30℃～40℃的條件下進行30min～24h。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜檢測采用的色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠柱；

任選地，所述色譜柱的粒徑為3μm～5μm，優選為3μm；

任選地，所述色譜柱長度為100mm～300mm，優選為150mm；

任選地，所述高效液相色譜檢測采用的柱溫為20℃-40℃；

任選地，所述高效液相色譜檢測采用的檢測波長為220nm-300nm，優選為260nm。